17β-雌二醇分子印迹复合微球的制备方法

摘要

一种17β-雌二醇分子印迹复合微球的制备方法，以1，4-二氧六环为溶剂，制备表面键合乙烯基的单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球，以表面键合乙烯基的单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球为载体，采用表面印迹技术制备成17β-雌二醇分子印迹复合微球，该方法反应条件温和，所得产物稳定性好，对17β-雌二醇的识别能力强、吸附速度快，可用于建立简便的提取、控化和浓缩样品预处理，对含雌激素产品的质量和成分进行评估，同时可用于经受高流速高压力操作的高效液相色谱，大大提高柱效与重现性，还可用作快速、高效的固相萃取吸附剂。

主权项

一种17β‑雌二醇分子印迹复合微球的制备方法，由下述步骤组成：(1)合成单分散聚苯乙烯分散液将苯乙烯、偶氮二异丁腈、聚乙烯吡咯烷酮加入无水乙醇中，苯乙烯与偶氮二异丁腈、聚乙烯吡咯烷酮、无水乙醇的质量比为1∶0.01～0.04∶0.1～0.3∶7.5～9，超声分散，通氮气除氧，搅拌，70℃聚合反应24小时，制备成聚苯乙烯；将聚苯乙烯用质量分数为0.2％的十二烷基硫酸钠水溶液超声分散，得到单分散聚苯乙烯分散液；上述聚乙烯吡咯烷酮的分子量为10000～70000；(2)制备单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球将过氧化苯甲酰、甲基丙烯酸环氧丙酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯、分散剂水溶液加入环己醇与甲苯的混合溶剂中，甲苯与环己醇、过氧化苯甲酰、甲基丙烯酸环氧丙酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯、分散剂水溶液的质量比为1∶2∶0.15∶2∶3∶60，用细胞破碎仪在功率为300～500W下超声，每间隔10～20秒超声1次，每次超声10～20秒，超声乳化至上层无油滴，加入到步骤(1)得到的单分散聚苯乙烯分散液中，甲基丙烯酸环氧丙酯与单分散聚苯乙烯分散液中聚苯乙烯的质量比为1∶0.1，30℃搅拌溶胀10小时，通氮气除氧，70℃聚合反应24小时，制备成单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球；上述分散剂水溶液中的分散剂为十二烷基硫酸钠和聚乙烯醇，十二烷基硫酸钠的质量分数为0.2％，聚乙烯醇的质量分数为2％，所述的聚乙烯醇的聚合度为1700，醇解度为88％；(3)抽提单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球将步骤(2)制备的单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球用甲苯在索式提取器中140℃抽提48小时，得到单分散多孔交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球；(4)单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球表面键合乙烯基将步骤(3)制备的单分散多孔交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球加入1，4‑二氧六环中，每100mL 1，4‑二氧六环中加入3～10g单分散多孔交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球，室温搅拌溶胀4～12小时，通氮气除氧，加入甲基丙烯酸羟乙酯与1，4‑二氧六环、三氟化硼乙醚的质量比为1∶2～5∶4～6的混合液，单分散多孔交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球与甲基丙烯酸羟乙酯的质量比为1∶0.1～2，30～60℃搅拌8～15小时，得到表面键合乙烯基的单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球；(5)合成17β‑雌二醇分子印迹复合微球以乙腈为溶剂，超声分散17β‑雌二醇、甲基丙烯酸、表面键合乙烯基的单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球，室温搅拌溶胀4～12小时，加入乙二醇二甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈，17β‑雌二醇与表面键合乙烯基的单分散交联甲基丙烯酸环氧丙酯微球的质量比为1∶20～120，17β‑雌二醇与甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈的摩尔比为1∶2～12∶8～20∶1～2，通氮气除氧，60～70℃聚合反应16～48小时，洗脱17β‑雌二醇，制备成17β‑雌二醇分子印迹复合微球。