果蔗腋芽脱毒组培快繁方法

摘要

本发明涉及甘蔗脱毒组培技术领域。提出一种果蔗脱毒组培快繁的方法，其特征在于包括如下步骤：1)植体的选取与灭菌；2)腋芽诱导培养；3)分化培养；4)增殖培养；5)生根培养；6)移栽；7)病毒(菌)检测。其特征在于步骤3)中的分化培养基配方为：MS+TDZ(0.001～0.01)mg/L+IBA(0.02～0.05)mg/L+蔗糖(30～40)g/L+精氨酸(100～150)mg/L+肌醇(100～150)mg/L。本发明以果蔗腋芽为外植体，接种操作容易，成活率高达90％以上。所采用的分化培养基配方，在分化培养过程中能快速使诱导芽分化出丛芽，采用本发明繁殖果蔗脱毒苗速度快，月繁殖系数达5～10倍，适合于大规模工厂化生产。

主权项

果蔗腋芽脱毒组培快繁的方法，包括如下步骤：1)外植体的选取与灭菌：取果蔗的腋芽，经灭菌处理后，作为所用外植体；2)腋芽诱导培养：将步骤1)处理后的腋芽在无菌条件下，摘取2～3mm的腋芽，接种在腋芽诱导培养基上，诱导芽生成；3)分化培养：将步骤2)的诱导芽移至分化培养基分化出丛芽；4)增殖培养：将步骤3)分化形成的丛芽切成每2～3株为一组接在增殖培养基中，再分化出丛芽；5)生根培养：将步骤4)增殖形成的丛芽切成单株接在生根培养基中进行生根培养，长成生根组培苗；6)移栽：当步骤5)的生根组培苗生长至3～5cm时，将生根组培苗移栽于移栽基质培养至成苗；7)病菌检测：利用PCR技术对步骤6)的成苗进行RSD菌检测；其特征在于步骤2)中采用的腋芽诱导培养基配方为：MS+6‑BA(0.5～1)mg/L+IBA(0.02～0.05)mg/L+活性炭(1～2)g/L+精氨酸(100150)mg/L+肌醇(100～150)mg/L；步骤3)中的分化培养基配方为：MS+TDZ(0.001～0.01)mg/L+IBA(0.02～0.05)mg/L+蔗糖(30～40)g/L+精氨酸(100～150)mg/L+肌醇(100～150)mg/L；步骤4)中的增殖培养基配方为：MS+6‑BA(0.5～1.5)mg/L+IBA(0.02～0.05)mg/L+蔗糖(20～40)g/L+精氨酸(100～150)mg/L+肌醇(100～150)mg/L；步骤5)中的生根培养基的配方为：MS+IBA(0.2～0.5)mg/L+NAA(0.1～0.2)mg/L+蔗糖(30～50)g/L+多效唑(0.5～1)mg/L。