肠道病毒71型VP1蛋白的原核表达及含有该蛋白的疫苗

摘要

本发明提供了一种肠道病毒71型VP1蛋白的原核表达方法，其是将肠道病毒71型的VP1基因序列克隆至原核表达载体中，并转化至大肠杆菌中进行诱导表达，然后对表达的VP1蛋白进行纯化和复性。将获得的VP1蛋白与免疫佐剂配伍制备疫苗。本发明首次利用大肠杆菌表达系统表达基因工程重组VP1蛋白，具有操作简单，成本低，易于实现大规模生产等优点。通过将原核表达的基因工程重组VP1蛋白与壳聚糖佐剂配伍后免疫小鼠，并评价其免疫学效果，初步证明了VP1蛋白不仅可以诱导产生体液免疫保护性反应，还可以诱导产生细胞免疫反应，为进一步研制人用基因工程重组VP1蛋白和灭活全病毒口服疫苗奠定了基础。

主权项

一种肠道病毒71型VP1蛋白的原核表达方法，其特征在于，其是将肠道病毒71型的VP1基因序列克隆至原核表达载体pET30a中，并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达；其中，肠道病毒71型VP1基因编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。