一种以子叶为外植体的黄连木植株再生方法

摘要

本发明公开了一种以子叶为外植体的黄连木植株再生方法，将饱满的黄连木种子去掉外面硬种皮，经过消毒后进行漂洗，接种在实生苗生长培养基上，得黄连木无菌实生苗，再取生长12-18d的黄连木无菌实生苗，在无菌超净台内沿胚轴中轴线纵切以切取子叶，将获得的两片子叶分别接种在子叶诱导培养基上，培养12-16d后，得幼芽，将幼芽切下转移至丛生芽增殖培养基，得诱导的丛生芽，然后将丛生芽切取转移至生根培养基，诱导生根，从而获得完整的黄连木植株。利用本发明进行再生繁殖，不仅再生效率高、出现变异的几率极低，而且为黄连木进行分子遗传改良提供了技术支持。

主权项

一种以子叶为外植体的黄连木植株再生方法，其特征在于包括以下步骤：A、将饱满的黄连木种子去掉外面硬种皮，经过消毒后进行漂洗，接种在实生苗生长培养基上，得黄连木无菌实生苗；B、取生长12‑18d的黄连木无菌实生苗，在无菌超净台内沿胚轴中轴线纵切以切取子叶，将获得的两片子叶分别接种在子叶诱导培养基上，培养12‑16d后，得幼芽；C、将幼芽切下转移至丛生芽增殖培养基，得诱导的丛生芽，然后将丛生芽切取转移至生根培养基，诱导生根，从而获得完整的黄连木植株；所述的实生苗生长培养基是指：1/2DKW基本培养基，不添加任何激素；所述的子叶诱导培养基是指：1/2WPM+DKW+6‑BA2.0mg/L+ IBA0.5mg/L+GA0.5 mg/L +PVP2g/L+葡萄糖20g/L+琼脂粉8g/L，pH=5.8‑6.0；所述丛生芽增殖培养基是指：1/2WPM+DKW+6‑BA3.0mg/L+ IBA0.5mg/L+GA0.5 mg/L +PVP2g/L+葡萄糖20g/L+琼脂粉8g/L，pH=5.8‑6.0；所述的生根培养基是指：1/2WPM+IBA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+PVP2g/L+葡萄糖20g/L+琼脂粉8g/L，pH=5.8‑6.0。