| 发明名称 |
重组羧肽酶B的制备方法 |
| 摘要 |
本发明涉及一种在毕赤酵母中制备重组羧肽酶B(CPB)的方法。该方法表达量很高，并且表达产物CPB酶原无需经过变性和复性，在直接酶切去除前肽后即可得到有活性的CPB，并且后续的纯化步骤也简单方便。制备的重组羧肽酶B可用于重组人胰岛素工业化生产。 |
| 申请公布号 |
CN102286502A |
申请公布日期 |
2011.12.21 |
| 申请号 |
CN201110213185.0 |
申请日期 |
2011.07.28 |
| 申请人 |
甘李药业有限公司 |
发明人 |
彭毅;张琪;张婷婷;王大梅 |
| 分类号 |
C12N15/55(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N9/48(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/55(2006.01)I |
| 代理机构 |
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代理人 |
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| 主权项 |
一种羧肽酶B(CPB)的制备方法，包括以下步骤：(1).提供一段核苷酸序列，所述核苷酸序列由编码CPB酶原的基因序列和编码组氨酸标签(His tag)的密码子组成，并且所述编码组氨酸标签的密码子在所述编码CPB酶原的基因序列的3’末端；(2).将上述核苷酸序列克隆到酵母表达载体中；(3).将上述载体转化至酵母宿主；(4).诱导上述酵母宿主表达C端带有组氨酸标签的CPB酶原；(5).酶切上述CPB酶原，生成C端带有组氨酸标签的CPB；(6).纯化上述CPB。 |
| 地址 |
101102 北京市通州区中关村科技园区通州园金桥科技产业基地景盛北三街8号 |
