达托霉素生产菌玫瑰孢链霉菌的代谢网络分析方法

摘要

本发明涉及达托霉素生产菌玫瑰孢链霉菌的代谢网络分析方法。1)根据糖酵解途径、戊糖磷酸途径、柠檬酸循环、回补反应和细胞合成反应的达托霉素合成反应，构建出中心代谢网络模型；2)将代谢网络模型转化为矩阵S(m×n)，收集发酵液，测量细胞干重、葡萄糖消耗速率、达托霉素生成速率和细胞生长速率；根据已知通量，求出未知通量。本发明将代谢网络分析技术应用于玫瑰孢链霉菌的代谢通量分析，通过测量胞外物质的代谢通量，计算得到胞内反应的代谢通量，反应出葡萄糖被菌体利用后在糖酵解途径、戊糖磷酸途径、柠檬酸循环和回补反应的分布情况，为定量化研究玫瑰孢链霉菌胞内的代谢特性提供了一个新的方法。

主权项

1.达托霉素生产菌玫瑰孢链霉菌的代谢网络分析方法，其特征是：1)根据生物化学中代谢反应原理、细胞组成和达托霉素分子组成，构建出中心代谢网络；2)将代谢网络转化为矩阵S(m×n)，其中m为胞内代谢物，n为反应，S(m，n)表示代谢物m在反应n中的计量系数，且有V表示反应通量，V为n维向量，在稳态条件下胞内代谢物的累积速率为0，则有S_CV_C+S_KV_K＝0，其中下标C表示未知通量的下标，K表示已知通量的下标，Vc表示未知通量，V_K表示已知通量，未知通量由公式求出；3)将玫瑰孢链霉菌在发酵罐中进行恒化培养，收集发酵液，测量细胞干重、葡萄糖消耗速率、达托霉素生成速率和细胞生长速率；4)将步骤3中测得的葡萄糖消耗速率、达托霉素生成速率和细胞生长速率分别除以细胞干重，得到比葡萄糖消耗速率、比达托霉素生成速率和比细胞生长速率，则为3个已知通量，带入步骤2中的公式，求出未知通量。