一种半锚定随机引物扩增测序的方法

摘要

本发明公开一种半锚定随机引物扩增测序的方法，根据已知DNA片段核苷酸序列信息，设计不同碱基数短链寡核苷酸序列作为扩增引物，进行聚合酶链反应，反应中的退火温度为36℃～40℃，使所述扩增引物既可以和已知序列特异锚定，又可以和已知序列上下游的未知序列进行非特异锚定；根据扩增产物电泳位置确定目的片段或用DNA印迹挑选目的片段，然后进行扩增产物的回收、测序及序列拼接，获取已知片段上下游DNA序列信息；通过调整随机扩增引物核苷酸数目及相应改变退火温度，利用锚定的特异性及非特异性特点，构建了更为方便、经济的扩增已知核苷酸片段两端未知序列的方法，为分子遗传学基础研究提供一个费用低廉、快速高效的技术手段。

主权项

一种半锚定随机引物扩增测序的方法，其特征在于：根据已知DNA片段核苷酸序列信息，设计不同碱基数短链寡核苷酸序列作为扩增引物；进行聚合酶链反应，反应中的退火温度为36℃～40℃，使所述扩增引物既可以和已知序列特异锚定，又可以和已知序列上下游的未知序列进行非特异锚定；根据扩增产物电泳位置确定目的片段或用DNA印迹挑选目的片段，然后进行扩增产物的回收、测序及序列拼接，获取已知片段上下游DNA序列信息。