一种利用化学杀雄剂高效活体转化基因的方法

摘要

本发明涉及化学杀雄、花粉管通道和花粉介导转化技术，属于分子育种和基因工程技术领域。本发明首先对现蕾期的农作物T0进行化学杀雄处理，再将花蕾进行柱头切除，接着利用花粉管通道技术，即用OD600=0.8的含有靶基因的农杆菌侵染液（附加5%蔗糖，500μL/L的SilwetL-77）混合可育花粉，用脱脂棉球蘸取菌液涂抹到切除柱头的子房上，遮光处理三天后正常生长，最后收取自交种。将T1代进行除草剂抗性筛选，对抗性植株进行PCR检测，确定阳性植株。本发明方法具有成本低、操作简单、不需要昂贵仪器设备和转化效率高等特点,转化率达1%-5%，适合于任何开花植物并可应用到大规模的农作物遗传转化中。

主权项

一种利用化学杀雄剂高效活体转化基因的方法，其特征在于，首先在植物现蕾期对可育植株进行化学杀雄，对杀雄后的不育植株进行柱头切除，取未经化学杀雄的同一材料的可育单株的花粉，加入含有靶基因的农杆菌菌液，然后通过花粉管通道技术和花粉介导法进行授粉，遮光处理三天，之后正常生长，收获自交种；将收获的种子种植于田间，进行抗除草剂筛选和PCR检测，最后进行阳性植株鉴定。