| 摘要 |
Способ получения альфа-фетопротеина из плацетарной и/или абортной крови человека путем отделения балластных белков из крови центрифугированием с добавлением вспомогательных веществ хлорида натрия, тритона Х-100, стерилизующей фильтрацией, проведением хроматографических очисток с использованием сорбентов Sephadex G25 и Sepharose DEAE и концентрирования, отличающийся тем, что перед центрифугированием дополнительно в кровь добавляют вспомогательные вещества - хлороформ и апротинин в следующей концентрации: ! Хлороформ - 0,005÷0,01%; ! Апротинин - 0,05÷0,1%; ! проводят перемешивание и экспозицию, а после центрифугирования и фильтрации в сыворотку крови добавляют подготовленный иммуносорбент Sepharose FF с антителами, поликлональными к альфа-фетопротеину, перемешивают и затем отмывают иммуносорбент от сыворотки крови буферным раствором, проводят элюцию белка с иммуносорбентом, концентрирование путем: пропускания белка через мембрану при температуре 2÷6°С, а хроматографическую очистку белка проводят с помощью гельфильтрации с заменой буфера на трис-соляную кислоту рН 6,3±0,2 и ионообменной хромотографии, проводя: градиентную элюцию буферным раствором трис-соляная кислота на 0,5 М хлориде натрия, а в конце проводят ультрафильтрацию с заменой буферного раствора, очистку с помощью сорбента Sepharose CNBr-4B с антителами к IgG человека и стерилизующую фильтрацию через стерильный фильтр. |
