叶酸分子靶向磁性纳米药物载体及靶向基因药物的制备方法

摘要

本发明公开了一种叶酸分子靶向磁性纳米药物载体的制备方法，其包括以下步骤：1）醛基化海藻酸钠（ASA）溶液的制备：将海藻酸钠（SA）溶于水中，加入强氧化剂，反应24-36h，加入乙醇终止反应；2）磁性纳米粒子MNPs溶液的制备：将亚铁盐、铁盐溶于水中，调节pH至9-10，搅拌，直至溶液颜色变为深黑色，取上清液，备用；3）醛基化海藻酸钠改性磁性纳米粒子ASAMNPs的制备：将步骤1）中的ASA溶液与步骤2）中的磁性纳米粒子MNPs溶液混合，80-90℃下反应30-50min，取上清液，备用；4）叶酸-氨基聚乙二醇FA-PEG-NH2的制备；5）FA-PEG-ASAMNPs的制备。本发明制作的载体FA-PEG-ASAMNPs对肿瘤细胞具有很好的主动响应性能，由于载体上连接磁性粒子，其又具备较好的磁响应性能。

主权项

一种叶酸分子靶向磁性纳米药物载体的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：1）醛基化海藻酸钠（ASA）溶液的制备：将海藻酸钠（SA）溶于水中，加入强氧化剂，反应24‑36h，加入乙醇终止反应；其中，海藻酸钠的质量：强氧化剂的质量：水的体积：乙醇的体积=1g：0.2‑0.3g：20‑30ml：1‑2ml；2）磁性纳米粒子MNPs溶液的制备：将亚铁盐、铁盐溶于水中，调节pH至9‑10，搅拌，直至溶液颜色变为深黑色，取上清液，备用；其中，Fe2+的物质的量：Fe3+的物质的量：水的体积=1mol：0.4‑0.6mol：80‑120L；3）醛基化海藻酸钠改性磁性纳米粒子ASAMNPs的制备：将步骤1）中的ASA溶液与步骤2）中的磁性纳米粒子MNPs溶液混合，80‑90℃下反应30‑50min，取上清液，备用；4）叶酸‑氨基聚乙二醇FA‑PEG‑NH2的制备：将叶酸（FA）、二环己基碳二亚胺（DCC）、N‑羟基琥珀酰亚胺（NHS）混合于非质子有机溶剂中，反应4‑8h，加入PEG2000（NH2）2，反应8‑10h，加水，过滤除去不溶物得FA‑PEG‑NH2溶液；其中，叶酸（FA）的质量：二环己基碳二亚胺（DCC）的质量：N‑羟基琥珀酰亚胺（NHS）的质量：非质子有机溶剂的体积：水的体积=1g：1.2‑1.5g：0.3‑0.5g：40‑60ml：180‑240ml；5）FA‑PEG‑ASAMNPs的制备：将步骤3）中的得到的ASAMNPs与步骤4）中得到的FA‑PEG‑NH2溶液在0.3‑0.6mol/L的硼酸钠溶液中混合，再加入硼氢化钠，室温下反应8‑10h，得到产物，其中，ASAMNPs质量：FA‑PEG‑NH2溶液中的FA‑PEG‑NH2质量：硼酸钠溶液体积：硼氢化钠质量=1g：0.5‑1g：30‑50ml：0.3‑0.5g。