发明名称 一种产L-苹果酸的基因工程菌及其构建方法和应用
摘要 本发明提供了一种产L-苹果酸的基因工程菌及其构建方法。本发明通过对L-苹果酸涉及的关键酶酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、苹果酸脱氢酶(MDH)和富马酸酶(FumC)进行改造,构建得到基因工程菌。本发明将fumC进行灭活性突变,致使代谢流在苹果酸向富马酸转化处中断,从而积累目的产物L-苹果酸;将在mdh前加上内源pepck基因的启动子使代谢流偏向苹果酸生成;此外,通过单氟乙酸钠诱导,使得PEPCK活性增强,并使产物反馈抑制大为减弱。将本发明菌株应用于L-苹果酸的发酵生产,能显著提高L-苹果酸产量,所用技术简单,效果明显,投入成本低,能够满足市场需求。
申请公布号 CN101649300B 申请公布日期 2011.06.15
申请号 CN200910092043.6 申请日期 2009.09.07
申请人 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 发明人 李荣杰;徐斌;薛培俭;段绪果
分类号 C12N1/20(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/01(2006.01)I;C12N15/76(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I;C12P7/46(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N;C12R1/19(2006.01)N 主分类号 C12N1/20(2006.01)I
代理机构 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人 王朋飞
主权项 一种产L‑苹果酸的基因工程菌,其出发菌为产琥珀酸的菌,其特征在于,所述菌株的富马酸酶基因突变,不具备富马酸酶活性,该突变是富马酸酶基因替换为苹果酸脱氢酶表达盒。
地址 233010 安徽省蚌埠市胜利西路北侧