携带HIV基因的腺病毒载体疫苗

摘要

本发明描述了一种腺病毒载体，它携带密码子优化的HIV结构基因和/或HIV调控和辅助基因，以及异源启动子和转录终止子。当单独或者联合质粒载体疫苗采用初次—加强免疫的方案时，该病毒载体疫苗可以用于预防HIV感染。

主权项

一种携带HIV基因的腺病毒载体疫苗，其特征在于：所述HIV基因是由经优化的HIV结构蛋白gag和pol、经优化的HIV调控蛋白rev和tat以及经优化的辅助蛋白vif、vpr、vpu和nef的多核苷酸组成的融合蛋白DNA，所述腺病毒载体为5型腺病毒Ad5，相关核苷酸序列如下：含有优化密码子的HIV1gag序列：atgggcgcca gggcctccat cctgaggggc ggcaagctgg acaagtggga gaagatcagg      60ctgaggcctg gcggcaagaa gcactacatg ctgaagcatc tggtctgggc ctccagggag     120ctggagaggt ttgccctgaa ccctggcctg ctggagacct ctgagggctg caagcagatc     180atcaagcagc tgcagcctgc cctgcagaca ggcacagagg agctgaggtc cctgttcaac     240acagtggcca ccctgtactg tgtgcatgct gagattgagg tgagggacac caaggaggcc     300ctggacaaga ttgaggagga gcagaacaag atccagcaga agacccagca ggccaaggag     360gctgatgaga aggtctccca gaactacccc attgtgcaga acctgcaggg ccagatggtg     420catcagcccc tgtcccccag gaccctgaat gcctgggtga aggtggtgga ggagaaggcc     480ttctcccctg aggtgatccc catgttcaca gccctgtctg agggcgccac cccccaggac     540ctgaacacca tgctgaacac agtgggcggc catcaggctg ccatgcagat gctgaaggac     600accatcaatg aggaggctgc tgagtgggac aggctgcatc ctgtgcatgc tggccctgtg     660gcccctggcc agatgaggga gcccaggggc tctgacattg ctggcaccac ctccaccctg     720caggagcaga ttggctggat gaccaacaac cctcccatcc ctgtgggcga gatctacaag     780aggtggatca tcctgggcct gaacaagatt gtgaggatgt actcccccac ctccatcctg     840gacatcaagc agggccccaa ggagccattc agggactatg tggacaggtt cttcaagacc     900ctgagggctg agcaggccac ccaggatgtg aagaactgga tgacagacac cctgctggtg     960cagaatgcca accctgactg caagaccatc ctgagggccc tgggccctgg cgcctccctg    1020gaggagatga tgacagcctg ccagggcgtg ggcggcccat cccacaaggc cagggtgctg    1080gctgaggcca tgtcccagac caacaacacc atcctgatgc agaggtccaa cttcaagggc    1140tccaagagga ttgtgaagtg cttcaactgt ggcaaggagg gccacattgc caagaactgc    1200agggccccca ggaagaaggg ctgctggaag tgtggcaagg agggccatca gatgaaggac    1260tgcacagaga ggcaggccaa cttcctgggc aagatctggc catcccacaa gggcaggcct    1320ggcaacttcc tgcagtccag gcctgagccc acagcccccc ctgctgagtc cttcaggttt    1380gaggagacca cccctgcccc caagcaggag cccaaggaca gggagcccct gacctccctg    1440aggtccctgt ttggctctga ccccctgtcc cagtaaa                             1477；含有优化密码子的HIV1pol序列：atggccccca tctcccccat tgagacagtg cctgtgaagc tgaagcctgg catggatggc      60cccaaggtga agcagtggcc cctgacagag gagaagatca aggccctgac agccatctgt     120gatgagatgg agaaggaggg caagatcacc aagattggcc ctgacaaccc atacaacacc     180cccatctttg ccatcaggaa gaaggactcc tccaagtgga ggaagctggt ggacttcagg     240gagctgaaca agaggaccca ggacttctgg gaggtgcagc tgggcatccc ccatcctgct     300ggcctgaaga agaagaagtc tgtgacagtg ctggctgtgg gcgatgccta cttctctgtg     360cccctggaca aggacttcag gaagtacaca gccttcacca tcccctctgt gaacaatgag     420acccctggca tcaggtacca gtacaatgtg ctgccccagg gctggaaggg ctcccctgcc     480atcttccagt gctccatgac caagatcctg gagccattca ggaagcagaa ccctgacatt     540gtgatctacc agtacatggc tgccctgtat gtgggctctg acctggagat tggccagcac     600aggaccaaga ttgaggagct gagggagcat ctgctgaagt ggggcttcac cacccctgac     660aagaagcatc agaaggagcc cccattcctg tggatgggct atgagctgca tcctgacaag     720tggacagtgc agcccatcca gctgcctgag aaggactcct ggacagtgaa tgacatccag     780aagctggtgg gcaagctgaa ctgggcctcc cagatctacc ctggcatcaa agtgaggcag     840ctgtgcaagc tgctgagggg cgccaaggcc ctgacagaca ttgtgcccct gacagaggag     900gctgagctgg agctggctga gaacagggag atcctgaagg agcctgtgca tggcgcctac     960tatgacccat ccaaggagct gattgctgag atccagaagc agggccagga ccagtggacc    1020taccagatct accaggagcc attcaagaac ctgaagacag gcaagtatgc caagatgagg    1080acagcccaca ccaatgatgt gaagcagctg acagaggctg tgcagaagat tgccatggag    1140tccattgtga tctggggcaa gatccccaag ttcaggctgc ccatccagaa ggagacctgg    1200gagacctggt ggacagacta ctggcaggcc acctggatac ctgagtggga gtttgtgaac    1260accccccccc tggtgaagct gtggtaccag ctggagaagg accccattgc tggcgtggag    1320accttctatg tggctggcgc tgccaacagg gagaccaaga ttggcaaggc tggctatgtg    1380acagacaggg gcaggaagaa gattgtctcc ctgacagaca ccaccaacca gaagacagcc    1440ctgcaggcca tctacattgc cctgcaggac tctggctctg aggtgaacat tgtgacagcc    1500tcccagtatg ccctgggcat catccaggcc cagcctgaca agtctgagtc tgagctggtg    1560aaccagatca ttgagcagct gatcaagaag gagagggtct acctgtcctg ggtgcctgcc    1620cacaagggca ttggcggcaa tgagcaggtg gacaagctgg tctccaatgg catcaggaag    1680gtgctgttcc tggatggcat tgacaaggcc caggaggagc atgagaagta ccactccaac    1740tggagggcca tggcctctga cttcaacctg ccccccattg tggccaagga gattgtggcc    1800tcctgtgacc agtgccagct gaagggcgag gccatgcatg gccaggtgga ctgctcccct    1860ggcatctggc agctggcctg cacccatctg gagggcaaga tcatcctggt ggctgtgcat    1920gtggcctctg gctacattga ggctgaggtg atccctgctg agacaggcca ggagacagcc    1980tacttcatcc tgaagctggc tggcaggtgg cctgtgaagg tgatccacac agccaatggc    2040tccaacttca cctctgctgc tgtgaaggct gcctgctggt gggctggcat ccagcaggag    2100tttggcatcc catacaaccc ccagtcccag ggcgtggtgg cctccatgaa caaggagctg    2160aagaagctga ttggccaagt gagggaccag gctgagcatc tgaagacagc tgtgcagatg    2220gctgtcttca tccacaactt caagaggaag ggcggcattg gcggctactc tgctggcgag    2280aggattgtgg acatcattgc cacagacatc cagaccaggg agctgcagaa gcagatcatc    2340aagatccaga acttcagggt ctactacagg gactccaggg accccatctg gaagggccct    2400gccaagctgc tgtggaaggg cgagggcgct gtggtgatcc aggacaactc tgacatcaag    2460gtggtgccca ggaggaaggc caagatcatc aaggactatg gcaagcagat ggctggcgct    2520gactgtgtgg ctggcaggca ggatgaggac taaa                                2554；含有优化密码子的HIV1rev序列：atggctggca ggtctggcga ctctgatgag gccctgctga gggctgtgag gatcatcaag     60atcctgtacc agtccaaccc ataccctgag cccaggggca ccaggcaggc caggaagaac    120aggaggagga ggtggagggc caggcagaac cagatccact ccatctctga gaggattctg    180tccacctgcc tgggcaggcc cacagagcct gtgcccctgc agctgccccc cctggagagg    240ctgcacatca cagactctga gaggggcggc acctctggca cccagcagcc ccagggcacc    300acagagggcg tgggctcccc ccagatcctg gtggagtccc ctgctgtgct ggagtctggc    360accaaggagt aaa                                                       373；含有优化密码子的HIV1tat序列：atggagcctg tggaccccaa cctggagcca tggaaccatc ctggctccca gcctgagaca     60gcctgcaaca actgctactg caagaggtgc tcctaccact gcctggtctg cttccagaag    120aagggcctgg gcatctccta tggcaggaag aagaggaggc agaggaggtc tgccccccag    180tcctctgagg accatcagaa cctgatctcc aagcagtccc tgcccaggac ccagggcgac    240caggctggct ctgaggagtc caagaagaag gtggagtcca agaccaagcc tgacccattt    300gactaaa                                                              307。含有优化密码子的HIV1vif序列：atggagaaca ggtggcaggt gctgattgtc tggcaggtgg acaggatgaa gatcaggacc     60tggaactccc tggtgaagca tcacatgtat gtctccagga gggccaatgg ctggttctac    120aggcatcact atgactccag gcatcccaag gtctcctctg aggtgcacat ccccctgggc    180gaggccaggc tggtgatcaa gacctactgg ggcctgcaga caggcgagag ggactggcat    240ctgggccatg gcgcctccat tgagtggagg ctgaggtcct acaacaccca gattgagcct    300ggcctggctg accagctgat ccacatgtac tactttgact gctttgctga ctctgccatc    360aggaaggcca tcctgggcca tgtggtgatc cccaggtgtg actaccaggc tggccacaac    420aacaaggtgg gctccctgca gtacctggcc ctgacagccc tgatcaagcc caagaggatc    480aagccccccc tgccatccat caagaagctg gtggaggaca ggtggaacaa cccccagaag    540atcaggggca ggaggggcaa ccacaccatg aatggccact aaa                      583；含有优化密码子的HIV1vpr序列：atggagcagc cccctgagga ccagggcccc cagagggagc catacaatga gtggaccctg     60gagctgctgg aggagctgaa gcaggaggct gtgaggcact tccccaggcc atggctgcat    120ggcctgggcc agtatgtcta tgagacctat ggcgacacct ggacaggcgt ggagaccatc    180atcaggattc tgcagcagct gctgttcatc cactttagga ttggctgcca gcactccagg    240attggcattg tgaggcagag gagggccagg aatggcgcct ccaggtctta aa            292；含有优化密码子的HIV1vpu序列：atgctggacc tggagctggc tgtgggcgcc ctgattgtgg ccctgatcat tgccattgtg     60gtctggacca ttgtctacat tgagtacagg aggctggtga agcagaggaa gattgactgg    120ctgatcaaga ggatcaggga gagggctgag gactctggca atgagtctga gggcgacaca    180gaggagctgt ccaccatggt ggacatgggc aggctgaggc tgctggatgt gaatgacctg    240taaa                                                                 244；含有优化密码子的HIV1nef序列：atggctggca agtggtccaa gtcctccatt gtgggctggc ctgccatcag ggagaggatc     60aggaggacag agcctgctgc tgatggcgtg ggcgctgtct ccagggacct ggagaagcat    120ggcgccatca cctcctccaa cacagctgac accaatgctg actgtgcctg gctggagacc    180caggaggagg aggaggtggg cttccctgtg aggccccagg tgcccctgag gcccatgacc    240ttcaagggcg ccctggacct gtccttcttc ctgaaggaga agggcggcct ggagggcctg    300atctactcca agaagaggca ggagatcctg gacctgtggg tctaccacac ccagggctac    360ttccctgact ggcacaacta cacccctggc cctggcgtga ggttccccct gacctttggc    420tggtgcttca agctggtgcc tgtggacccc agggaggtgg aggaggccaa tgagggcgag    480gacaactgtg ctgcccatcc tgtctgccag catggcatgg aggatgagca cagggaggtg    540ctgaagtgga agtttgactc ccagctggcc cacaggcaca gggccaggga gctgcatcct    600gagttctaca aggactgcta aa                                             622。