利用黑曲霉液体深层发酵产纤维素酶

摘要

本发明提供了一种新的纤维素酶生产方法，其步骤包括：将黑曲霉接种到产孢子培养基中培养4d，培养完成后制成菌悬液，取15ml接种到配有200ml液体发酵培养基的1L三角瓶中，于32℃、150r/min转速下放于恒温震荡培养箱中培养24h，然后降低温度到28℃继续培养36h。发酵液经板框过滤，超滤浓缩和喷雾干燥制得纤维素酶干粉。本发明操作工艺简单，原料易得，生产成本低，无污染，为一种理想的纤维素酶制取方法。

主权项

利用黑曲霉液体深层发酵产纤维素酶，其特征包括以下几个步骤：(1)配置营养盐液以Mandels氏营养盐为基础再加入NaNO3 4.0g/l，配置成一种新的营养盐备用。(2)黑曲霉的选育及培养将菌种保藏培养基上的黑曲霉菌接种到产孢子培养基上，于28℃下放入恒温培养箱中培养4‑5d。(3)配置液体发酵培养基用改良的Mandels氏营养盐为底物配置液体发酵培养基，加入玉米芯80g/L，蛋白胨6g/L，麦芽糖10g/L，再加入一定量的KH2PO4/K2HPO4缓冲溶液调节PH于5.8左右，配200ml装入1L的三角摇瓶。(4)接种发酵培养将培养好的新鲜产孢子斜面上的孢子制成菌悬液，接种15ml到发酵培养基中，于32℃、150r/min转速下放入恒温震荡培养箱中培养24h，下调温度至28℃，继续培养36h。(5)纤维素酶提取将搅拌发酵后的发酵液通过板框压滤，滤布目数为768，压滤速率为5吨/小时。压滤后的发酵液再经超滤浓缩，使滤液浓度浓缩为原来的15‑20倍。浓缩后的滤液经喷雾干燥后制得纤维素酶干粉。