发明名称 |
一种三角帆蚌基因型快速精确鉴定方法 |
摘要 |
本发明的一种三角帆蚌基因型快速精确鉴定方法,包括三角帆蚌基因组DNA的快速提取,三角帆蚌微卫星序列扩增和三角帆蚌基因型鉴定的方法。首先,利用Chelex100能有效除去非核酸有机物的特点,建立了Chelex-100DNA快速提取方法,实现了DNA提取过程中细胞裂解和DNA萃取的同步化;然后根据Chelex100法提取的DNA溶液特点,优化PCR反应体系,建立了三角帆蚌微卫星序列扩增的方法;最后,采用ABI3730核酸分析仪检测,用GeneMapper软件(AppliedBiosystems)进行基因型分析,建立了三角帆蚌基因型快速精确鉴定方法。此方法具有高效、快速、准确、对人体无害等优点。 |
申请公布号 |
CN101993955A |
申请公布日期 |
2011.03.30 |
申请号 |
CN201010580578.0 |
申请日期 |
2010.12.09 |
申请人 |
上海海洋大学 |
发明人 |
白志毅;李家乐;罗明;林静云 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
上海天翔知识产权代理有限公司 31224 |
代理人 |
吕伴 |
主权项 |
三角帆蚌基因型快速精确鉴定方法,其特征在于,具体包括如下:1)、三角帆蚌基因组DNA的抽提步骤取三角帆蚌组织用Chelex‑100溶液,从三角帆蚌组织中抽提出含基因组DNA的上清液,用0.8‑1%的琼脂糖胶电泳检测;2)、三角帆蚌SSR序列扩增步骤采用上述上清液作为DNA模板,进行PCR扩增,PCR扩增产物经1.5%琼脂糖凝胶检测,EB染色,于凝胶成像系统下观察并拍照记录;3)、三角帆蚌基因型鉴定凝胶电泳预检测合格的PCR扩增反应产物,采用ABI3730核酸分析仪检测,用GeneMapper软件(Applied Biosystems)进行基因型分析,并由Excel格式输出结果。 |
地址 |
201306 上海市浦东新区临港新城沪城环路999号 |