利用分子标记技术鉴定猴头菇菌种猴王的方法

摘要

利用分子标记技术鉴定猴头菇菌种猴王的方法包括菌丝培养与收集、基因组DNA的提取、SCAR-PCR分子标记的检测建立和SCAR-PCR产物的检测。使用猴王F2/R2检测引物，SCAR-PCR产物的检测结果在DNA图谱中显示的分子量为371bp的特异DNA条带，为猴头菇菌种猴王的标志。

主权项

一种利用分子标记技术鉴定猴头菇(Hericium erinaceus)菌种猴王的方法，包括菌丝培养与收集、基因组DNA的提取、SCAR‑PCR分子标记的检测建立和SCAR‑PCR产物的检测；其特征在于（1）SCAR‑PCR分子标记的检测，使用的检测引物是猴王F2/R2，其中，猴王F2是5'‑CCCTCCACAACCACCACAAGATAAT‑3'，猴王R2是5'‑CTCCTCGCCGTCTGCATAAGAACTC‑3'；（2）SCAR‑PCR分子标记的检测建立：SCAR‑PCR扩增体系为10×PCR buffer 2.5 μl， 25mmol/L MgCL2  1 μl， 2.5 m mol/L dNTP 2 μl，5 U/ul Taq DNA Polymerase 0.3 μl，10μmol/L检测引物各1 μl，1ng～10ng/μl模板DNA 1μl，ddH2O 16.2 μl；SCAR‑PCR反应条件为94℃ 1min；94℃ 45second，67℃ 45second，72℃ 1min，30个循环；72℃ 5min；（3）SCAR‑PCR产物的检测结果：在电泳检测的DNA图谱中显示，扩增出的分子量为371bp 的特异DNA条带，为猴头菇菌种猴王的标志。