克伦特罗液相芯片探针的制备方法

摘要

本发明涉及免疫化学技术领域的一种克伦特罗液相芯片探针的制备方法，其通过采用碳化二亚胺法，以对-氨基苯甲酸、间-氨基苯甲酸或邻-氨基苯甲酸修饰羧基化聚苯乙烯荧光微球表面，再通过碳化二亚胺法将克伦特罗分子标记到荧光微球表面的方式，制成克伦特罗液相芯片探针。该克伦特罗液相芯片探针的制备方法简便操作，稳定性好，且产物具有优良的克伦特罗靶向性，可为克伦特罗的液相芯片测试技术开发提供了更为方便的途径。

主权项

一种克伦特罗液相芯片探针的制备方法，其特征在于，该方法为：(1)取羧基化聚苯乙烯荧光微球均匀分散于pH值为6.0～7.0，含0.05M～0.2M的磷酸盐缓冲溶液中，经超声处理后，再加入过量新鲜配置的50mg/ml氮羟基琥珀酰亚胺磺酸盐和50mg/ml水溶性碳二亚胺水溶液，在室温下暗处震荡孵育15～60min，而后离心移去上清，加入过量0.01wt％～0.1wt％的对‑氨基苯甲酸、间‑氨基苯甲酸或邻‑氨基苯甲酸溶液，室温下暗处孵育15～30min后，再次离心移去上清，以pH值为7.2～8.0，浓度为0.05M～0.2M的磷酸盐缓冲溶液洗涤沉淀物，制得初次活化后的荧光微球；(2)将上述初次活化后的荧光微球加入过量新鲜配制的含50mg/ml氮羟基琥珀酰亚胺磺酸盐和50mg/ml水溶性碳二亚胺的水溶液中，均匀混合后，室温下暗处震荡孵育15～30min，完成对荧光微球的再次活化，其后加入过量的含0.01～1μg/mL克伦特罗的磷酸盐缓冲溶液，室温下暗处震荡孵育1～2h，其后离心移去上清，以pH值为7.2～8.0，浓度为0.05M～0.2M的磷酸盐缓冲溶液洗涤沉淀物，制得目标产物克伦特罗液相芯片探针。