一种坏死梭杆菌的基因检测分型方法及试剂盒

摘要

本发明公开一种致病性坏死梭杆菌的基因检测分型方法。根据坏死梭杆菌白细胞毒素启动子区序列设计3条引物，建立了聚合酶链式反应(PCR)检测方法，制成的试剂盒具有检测速度快，特异性好，灵敏度高，使用步骤简单，可重复性高，可以快速的对坏死梭杆菌进行检测分型。

主权项

一种坏死梭杆菌快速检测分型的方法，根据坏死梭杆菌白细胞毒素启动子区序列设计3条特异性引物，两个亚种FNN和FNF分别扩增出1076 bp和809 bp的特异性片段，其中P1和P2分别位于坏死梭杆菌FNN亚种和FNF亚种白细胞毒素启动子区，P3为下游公共引物；引物如下：P1:5‑GCTCTCCTGCTTGTTTATTTC‑3P2:5‑GATCTTTGTTGGAAGCGAGT‑3P3:5‑GCACGACAAACCAAATAGC‑3具体步骤如下：1）采集并初步处理待检样品；2）从样品中抽提DNA；3）使用上述特异性引物进行PCR扩增；4）对步骤(3)中的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，分离目的条带；5）对电泳结果进行分析，确定样品中是否有坏死梭杆菌以及是坏死梭杆菌的哪个亚种感染。