一种利用多重PCR检测鸭粪中三种原虫的方法

摘要

本发明涉及PCR检测领域，具体涉及一种利用多重PCR检测鸭粪中三种原虫的方法，其中所述原虫为贝氏隐孢子虫、环孢子虫和菲莱氏温扬球虫。本发明检测方法是根据鸭环孢子虫ITS-1基因，菲莱氏温扬球虫18S rRNA基因和贝氏隐孢子虫ITS-1+片段，分别设计出3对特异性引物，通过多重PCR反应可以快速准确地检测鸭粪中的贝氏隐孢子虫、环孢子虫和菲莱氏温扬球虫卵囊，对鸭的隐孢子虫病、环孢子虫病和球虫病作出鉴别诊断。本发明检测方法可以同时检测三种原虫，敏感性、特异性好，比常规PCR更加快捷经济，可用于鸭肠道原虫病的鉴别诊断和分子流行病学调查或水源性隐孢子病和环孢子虫病爆发的风险评估。

主权项

一种利用多重PCR检测鸭粪中三种原虫的方法，所述原虫为贝氏隐孢子虫、环孢子虫和菲莱氏温扬球虫，其特征在于所述检测方法是根据鸭环孢子虫ITS 1基因，菲莱氏温扬球虫18S rRNA基因和贝氏隐孢子虫ITS 1+片段，分别设计出3对特异性引物，引物序列如SEQ ID NO：1～6所示，通过多重PCR反应结果来检测样本是否为鸭隐孢子虫、环孢子虫和球虫，其中，鸭环孢子虫ITS 1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示，菲莱氏温扬球虫18S rRNA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示。