磺酸化胆汁酸酶荧光毛细分析法及酶荧光定量试剂盒

摘要

本发明公开了磺酸化胆汁酸(SBA)酶荧光毛细分析法及SBA荧光定量试剂盒(SBA-FCA-Kit)，属于临床生化检验领域，适用于肝胆疾病的快速筛查和诊断，尤其适用于新生儿期黄疸、先天性胆道闭锁症的早期发现。生物样品与荧光反应液混合后，用一个含有磺酸化胆汁酸磺酸酯酶、β-羟基类固醇脱氢酶的SBA毛细生物反应器(SBA-CBR)吸入，在给定的激发波长和发射波长下，测定SBA-CBR的空白荧光强度；然后使其继续反应一定时间，再测其荧光强度；用荧光强度差值定量样品中的SBA。SBA-FCA-Kit由一个SBA-CBR和含有β-NAD+、电子传递体及刃天青等的荧光反应液构成。

主权项

1.一种测定磺酸化胆汁酸(SBA)的酶荧光毛细分析法，其特征在于：先将一个代替常规荧光试液槽的毛细管定位座置于荧光光度计或自动临床荧光生化分析装置光路中；由β-NAD⁺、电子传递体、刃天青构成的荧光反应液(1)与适量生物样品(S)混匀后，在适当温度下反应一段时间，用一个在内表面修饰有磺酸化胆汁酸磺酸酯酶(BSS)(6)和β-羟基类固醇脱氢酶(β-HSD)(7)、称为磺酸化胆汁酸毛细生物反应器(SBA-CBR)(2)的毛细管(3)吸入上述反应混合液(8)，然后插入荧光光度计的毛细管(3)定位座插孔中，在给定的激发波长和发射波长条件下，立即测定磺酸化胆汁酸毛细生物反应器(SBA-CBR)(2)内所含反应混合液的荧光强度，此值作为样品和试剂空白值(F₁)；然后使其继续反应数分钟后，再测其荧光强度(F₂)；此值减掉样品和试剂空白值(ΔF＝F₂-F₁)，得到的吸光度增加值(ΔF)用于定量样品(S)中的磺酸化胆汁酸(SBA)值，毛细管(3)做为荧光反应、测定或酶固定化的载体。