一种从紫菜中分离纯化高纯度藻胆蛋白的方法

摘要

一种从紫菜中分离纯化高纯度藻胆蛋白的方法。现有的藻胆蛋白一般都是从螺旋藻中分离，并且分离技术也尚存在一些缺陷，使制得的藻胆蛋白纯度低，得率亦不高，以使高纯度藻胆蛋白的价格高昂。本发明的主要特征是采用从紫菜中分离纯化高纯度藻胆蛋白的方法，主要包括以下步骤：在低温下高速捣碎紫菜，离心得上清夜，硫酸铵多次盐析法制备藻胆蛋白初提液，再经透析和高速离心，将得到的溶液上羟基磷灰石柱，用低浓度分步洗脱分别得到藻红蛋白和藻蓝蛋白，再用高浓度洗脱可得到变藻蓝蛋白。本发明的从紫菜中分离纯化高纯度藻胆蛋白的方法工艺简单，成本低廉，方便实用。

主权项

一种从紫菜中分离纯化高纯度藻胆蛋白的方法，其特征在于选取原料为紫菜，在温度为4℃下进行以下各项操作步骤：(1)、进行高速捣碎，高速捣碎以间隙捣碎方式进行，以免温升超过4℃以上，高速捣碎转速为10000～12000转/分，后以5000转/分低速离心15分钟的方法得到紫菜最初提取液；(2)、将上述所提取溶液加硫酸铵至20％饱和度，接着以10000转/分中速离心15分钟后取上清液，继续加硫酸铵至50％饱和度，再以10000转/分中速离心15分钟后取沉淀；(3)、将沉淀用pH 6.8的0.001M的磷酸盐缓冲液溶解，加硫酸铵至10％饱和度，中速离心取上清液，继续加硫酸铵至40％饱和度，中速离心取沉淀，中速离心都取为10000转/分，中速离心时间均是15分钟；(4)、再将沉淀用pH 6.8的0.001M的磷酸盐缓冲液溶解后以15000转/分，高速离心30分钟，上清液脱盐，再以15000转/分高速离心30分钟后上羟基磷灰石柱；(5)、用pH 6.8的0.010M至0.030M的磷酸盐缓冲液将藻红蛋白从羟基磷灰石上洗脱下来并收集；(6)、用pH 6.8的0.040M的磷酸盐缓冲液将藻蓝蛋白从羟基磷灰石上洗脱下来并收集；(7)、用pH 6.8的0.100M至0.120M的磷酸盐缓冲液将变藻蓝蛋白从羟基磷灰石上洗脱下来并收集，得到的藻红蛋白纯度以该藻红蛋白在564nm的光谱吸收值与在280nm的光谱吸收值的比值表示达到4.5-6，得到的藻蓝蛋白纯度以该藻蓝蛋白在615nm的光谱吸收值与在280nm的光谱吸收值的比值表示达到4-6。