发明名称 用猪肾细胞系(IBRS-2)生产猪瘟活疫苗的方法及其制品
摘要 本发明公开了一种用猪肾细胞系(IBRS-2)生产猪瘟活疫苗的方法。本发明包括如下技术步骤:(1)选择猪肾细胞系(IBRS-2)作为制苗用细胞;(2)制苗用细胞的传代与培养;(3)细胞毒种的繁殖;(4)制苗毒液的繁殖;(5)配苗、分装及冻干。本发明具有生产工艺简单且稳定、易操作,病毒含量高,批间差异小,质量易控,可显著提高疫苗产量和质量。利用本发明生产的猪瘟活疫苗安全性好、免疫效力高,对猪瘟强毒攻击具有完全的免疫保护作用。
申请公布号 CN101850115A 申请公布日期 2010.10.06
申请号 CN201010116766.8 申请日期 2010.02.23
申请人 广东永顺生物制药有限公司;中国兽医药品监察所 发明人 吴文福;宁宜宝;张毓金;林旭埜;岑小清;任向阳;游启有;杨傲冰;丘成文;刘秋燕;刘法连
分类号 A61K39/187(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;C12N7/00(2006.01)I;C12N7/02(2006.01)I 主分类号 A61K39/187(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 用猪肾细胞系(IBRS-2)生产猪瘟活疫苗的方法,其特征在于:包括如下技术步骤:(1)选择猪肾细胞系(IBRS-2)作为制苗用细胞:(2)制苗用细胞的传代与培养:猪肾细胞系(IBRS-2)经EDTA-胰酶细胞分散液消化传代,以细胞生长液继续培养,形成良好单层时,用于继续传代或接种病毒;(3)细胞毒种的繁殖:用细胞维持液,将新鲜脾毒制成病毒悬液,接种由步骤(2)制得良好单层的猪肾细胞系(IBRS-2),继续培养;每隔4~5日收获换液一次,取二收、三收细胞培养毒液作为生产用毒种;(4)制苗毒液的繁殖:取步骤(2)中已形成良好单层的猪肾细胞系(IBRS-2)培养瓶,弃去所述细胞生长液,接种含猪瘟兔化弱毒的细胞维持液,继续培养;接毒后第5日作第一次收获换液,以后每隔4日收获换液1次,收获的毒液置-15℃以下保存;(5)配苗、分装及冻干:将检验合格的步骤(4)中所述毒液,混合于同一容器内,加入稳定剂,同时加入抗生素,充分摇匀,定量分装;每头份含细胞毒液不少于0.015ml,分装后迅速进行冷冻真空干燥后即得成品。
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