发明名称 一种检测石蜡标本DNA甲基化的方法
摘要 本发明涉及一种检测石蜡标本DNA甲基化的方法,包括如下步骤:石蜡切片脱蜡、细胞裂解、DNA亚硫酸氢钠修饰、脱磺化、修饰后的DNA纯化、PCR扩增和检测分析,整个修饰过程DNA没有从切片中抽提出来,DNA修饰、脱磺化等操作均在细胞内进行,不仅节省了时间,而且避免了因酚氯仿抽提过程中DNA的反复沉淀、溶解转移而造成的DNA损失和断裂,还有利于环境保护。
申请公布号 CN101285097B 申请公布日期 2010.09.08
申请号 CN200810038455.7 申请日期 2008.06.03
申请人 中国人民解放军第二军医大学 发明人 卫立辛;张春东;蒋国成;程越;郭献灵;吴孟超
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 上海德昭知识产权代理有限公司 31204 代理人 丁振英
主权项 一种检测石蜡标本DNA基因甲基化的PCR模板制作方法,包括如下步骤:石蜡切片脱蜡、酒精水化、DNA亚硫酸氢钠修饰、脱磺化、修饰后的DNA纯化、PCR扩增和检测分析,其特征在于先将石蜡标本切片固定在载玻片或过滤柱上,直接依次进行脱蜡、酒精水化、亚硫酸氢钠修饰、脱磺化处理,再用裂解液和蛋白酶K消化后从细胞中释放出DNA修饰产物,纯化后用作PCR模板。
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