一种高效分泌表达重组角质酶的基因工程菌及其构建方法

摘要

一种高效分泌重组角质酶的基因工程菌及其构建方法，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带2种重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3)，所述重组质粒为携带α-溶血素(α-hlyA)途径中特有基因的质粒pSTV28及含有角质酶-hlyAs基因的质粒pET20b(+)。该基因工程菌的构建：包括构建两个关键重组质粒并分别转化大肠杆菌BL21(DE3)，获得高效分泌重组角质酶的基因工程菌。用所述的基因工程菌生产角质酶包括液体培养和诱导表达两个步骤。以嗜热单胞菌Thermobifida fusca WSH03-11角质酶Tfu_0883作为报告蛋白，摇瓶发酵表明角质酶胞外产量是306U/mL，为本研究室前期工作采用II型分泌途径产量的1.7倍，实现了角质酶的高效分泌表达。

主权项

一种高效分泌表达重组角质酶的基因工程菌，其特征在于，该基因工程菌是携带2种重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3)，所述重组质粒为携带α-溶血素(α-hlyA)途径中修订基因的质粒pSTV28及含有角质酶-hlyAs基因的质粒pET20b(+)。