主权项 |
一种类肝素多糖的制备方法,其特征在于包括以下步骤:(1)磷酸处理:将甲壳素与60wt%~90wt%的磷酸按质量比为1∶10~30的比例混合,室温下搅拌至甲壳素完全溶解,接着在搅拌条件下将该溶液加入到水中,水的质量为甲壳素质量的30~200倍,沉淀后离心分离,再用水洗涤沉淀至中性得到酸处理产物;(2)6位选择性氧化反应:将酸处理产物分散于水中,水的质量为甲壳素质量的20~50倍,冰浴条件下加入2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基和NaBr固体,2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基和NaBr固体的质量分别为甲壳素质量的0.5%~2%和10%~45%,搅拌至完全溶解后加入3wt%~10wt%的NaClO溶液,NaClO溶液的质量为甲壳素质量的8~30倍,反应过程中使溶液的pH值稳定在9.5~10.8,反应0.5~1小时,然后加入甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇,甲醇、乙醇、正丙醇或异丙醇的质量为NaClO溶液质量的0.05~0.3倍,调节体系pH值至中性,然后将溶液透析或超滤净化,再减压蒸馏浓缩,用甲醇、乙醇、丙酮或乙醚沉淀,将沉淀物真空干燥得到6位选择性氧化反应产物;(3)脱乙酰反应:将6位选择性氧化反应产物分散在NaOH的乙醇-水溶液中,该NaOH的乙醇-水溶液中NaOH的浓度为10wt%~35wt%,乙醇与水的体积比为4~8∶1,该NaOH的乙醇-水溶液的质量为甲壳素质量的10~30倍,然后在50~70℃搅拌反应0.5~2小时,反应结束后过滤,将产物用水溶解后再调节体系pH值至中性,透析或超滤净化,减压蒸馏浓缩,用甲醇、乙醇、丙酮或乙醚沉淀,真空干燥得到脱乙酰反应产物;(4)将脱乙酰反应产物经磺化反应或硫酸酯化反应得到类肝素多糖,所述磺化反应的具体方法为:将脱乙酰反应产物溶解于水中,水的质量为甲壳素质量的10~100倍,接着加入三甲胺-三氧化硫复合物和Na2CO3,三甲胺-三氧化硫复合物和Na2CO3的加入量分别为甲壳素糖残基物质的量的3~10倍和2.5~5.0倍,于40~65℃恒温搅拌反应8~16小时,然后将反应液经透析或超滤净化,减压蒸馏浓缩,用甲醇、乙醇、丙酮或乙醚沉淀,真空干燥得到类肝素多糖;所述硫酸酯化反应的方法为:将脱乙酰反应产物分散于DMF、DMSO或甲酰胺中,DMF、DMSO或甲酰胺的质量为甲壳素质量的10~50倍,在40~60℃搅拌0.5~2小时,然后加入三氧化硫吡啶复合物,三氧化硫吡啶复合物与脱乙酰反应产物糖残基的物质的量之比为1~4∶1,搅拌反应3~6小时,将反应液经冰水冷却,再用1wt%~10wt%的碱溶液中和,然后将反应液透析或超滤净化,减压蒸馏浓缩,用甲醇、乙醇、丙酮或乙醚沉淀,真空干燥得到类肝素多糖; |