一种对稻曲病菌进行药剂抑菌活性的快速测定方法

摘要

本发明公开了一种对稻曲病菌进行药剂抑菌活性的快速测定方法，属于真菌病菌药剂生物测定技术领域。该方法包括：(1)培养基的制备；(2)菌株的活化培养；(3)稻曲病菌种子液的培养；(4)待测药剂培养液的配制；(5)稻曲病菌在药剂培养液内的培养与生长量的测定；(6)药剂抑菌活性的计算等步骤。本发明系根据稻曲病菌生长缓慢及菌丝生长呈叠加堆积状的特性而设计，与常规的平皿抑菌法相比，具有检测速度快，由4-6周缩短为2周；提高了稻曲病菌对药剂的敏感性与测定准确性；减少了检测期的污染概率，降低了测定成本等特点。本发明可在稻曲病菌药剂生物测定技术领域应用。

主权项

一种对稻曲病菌进行药剂抑菌活性的测定方法，其特征在于按以下步骤进行：(1)培养基的制备：平皿培养采用由土豆150g，蔗糖10g，酵母粉100mg，蛋白胨100mg，琼脂18g，pH值6.5，1000ml蒸馏水，121℃，高压灭菌而成的YPPSA培养基；液体培养采用YPPS培养液，在配制YPPSA培养基时删去琼脂，即为YPPS培养液；(2)稻曲病菌菌株的活化培养：挑取少许保存的稻曲病菌菌丝块至步骤(1)YPPSA平皿培养基中，28℃恒温暗培养，活化菌株；(3)稻曲病菌种子液的培养：挑取少许步骤(2)培养的稻曲病菌菌块，接入盛有步骤(1)YPPS培养液的三角瓶中，28℃，150rpm，振荡培养3-5天至菌液混浊，待用；(4)待测药剂培养液的配制：将各供试药剂称量，每一重量药剂分别与一等量盛入三角瓶中的步骤(1)YPPS的培养液相混合，配制成具有系列浓度的含药培养液，每处理设置3-5次重复；(5)稻曲病菌在药剂培养液内的培养与生长量的测定：在每一盛有等量步骤(4)系列浓度含药培养液的三角瓶中，分别等量接入步骤(3)的稻曲病菌种子液，28℃，150rpm，振荡培养7天；抽滤稻曲病菌培养物在滤纸上，70℃，10小时，烘干后，分析天平测定其干物质重量；(6)稻曲病菌药剂抑菌活性的计算：以不加药为对照，分别计算不同药剂、不同剂量对稻曲病菌干物质量积累的抑制率，并查机率值表换算成相应机率值，浓度换算成对数，做回归，求出EC50或ED50值。