利用一维微流控生物芯片检测细胞中基因突变的方法

摘要

本发明公开了一种利用一维微流控生物芯片检测细胞中基因突变的方法，其特征在于构建基于一维微流控微珠阵列芯片的功能化的突变检测芯片，将总RNA或靶DNA样品于包含有荧光探针的杂交缓冲液中稀释，并在压力驱动下流过微通道进入功能化微珠阵列，杂交后将含有甲酰胺的高严谨洗脱液注入通道进行洗脱，最后通过荧光倒置显微镜观察及拍摄微珠表面荧光，并用软件对颗粒的表面荧光强度进行估算，根据荧光强度的差别判断该检测位点的突变类型。本发明方法解决了基因突变分析方法中微量检测、高灵敏度以及高通量分析等特点难以并存的缺陷，并有望实现单细胞水平上的基因突变分析。

主权项

1.一种利用一维微流控生物芯片检测细胞中基因突变的方法，包括一维微流控生物芯片上二氧化硅微珠用碱活化，再用生物素与亲和素进行预处理，然后分别加入生物素修饰的突变检测捕获探针，将修饰了突变检测捕获探针的二氧化硅微珠逐个移入所述生物芯片微通道的小室，形成功能化微珠阵列，其特征在于将总RNA或靶DNA样品于包含有荧光探针的杂交缓冲液中稀释，并在压力驱动下以0.1μl/min的流速流过微通道进入功能化微珠阵列，杂交后将含有甲酰胺的高严谨洗脱液注入通道进行洗脱，所述甲酰胺在高严谨洗脱液中的体积分数为60％，最后通过荧光倒置显微镜观察及拍摄微珠表面荧光，并用软件对颗粒的表面荧光强度进行估算，根据荧光强度的差别判断该检测位点的突变类型。