胶体金标记试纸条鉴别蛇毒的方法

摘要

本发明公开了一种胶体金标记试纸条鉴别蛇毒的方法，(1)制作蛇毒种特异性抗体；(2)制作蛇毒鉴别胶体金标记试纸条；(3)取被蛇咬者的血清进行蛇毒鉴别。从而迅速作出诊断结果，进行准确的治疗。本发明采用亲和纯化的种特异性蛇毒IgG抗体作为蛇毒鉴别的主体，首次将其标记在胶体金标记试纸上，利用双抗夹心法的原理，对蛇毒进行快速的检测，然后针对性输入抗蛇毒血清，达到快速准确治疗的目的。

主权项

1、一种胶体金标记试纸条鉴别蛇毒的方法，其特征在于按如下步骤进行：(1)制作蛇毒种特异性抗体，将一个地区常见的4～8种毒蛇的蛇毒取出，分别多点皮内注射免疫家兔，再放取每一种蛇毒免疫的家兔血进行离心取血清，通过protein A柱纯化得到每一种毒蛇IgG抗体备用；再将每一种毒蛇免疫家兔得到的纯化IgG抗体与该毒蛇毒素偶联的CNBr-激活的琼脂糖4B柱中抗原结合，洗脱杂蛋白，得到纯化的蛇毒抗体备用；最后将每一种纯化的蛇毒抗体依次通过其余几种毒蛇的毒素偶联的CNBr-激活的琼脂糖4B柱，得到不与其它毒蛇毒素结合的种特异性抗体；(2)制作蛇毒鉴别胶体金标记试纸条，设置底纸条(1)，该底纸条(1)上端设有手柄(2)，该底纸条(1)下端粘贴有胶体金标记的纤维薄膜(3)，在所述手柄(2)与纤维薄膜(3)之间的底纸条(1)上贴有硝酸纤维素膜(4)，所述硝酸纤维素膜(4)靠手柄(2)的一端从上到下依次标记有阳性对照(5)和阴性对照(6)，该阴性对照(6)与纤维薄膜(3)之间的硝酸纤维素膜(4)上标记由步骤(1)制备的4～8种蛇的蛇毒种特异性抗体(7)；所述纤维薄膜(3)上段包裹有步骤(1)所述4～8种蛇的蛇毒种特异性抗体的复合特异性抗体；(3)蛇毒鉴别，取蛇咬者的血清沾在步骤(2)制得的蛇毒鉴别胶体金标记试纸条的纤维薄膜下端，血清经纤维薄膜向上移动，血清中的抗原首先与纤维薄膜上段的蛇抗兔的复合特异性抗体相对应的蛇毒抗体相结合，再与硝酸纤维素膜上标记的相对应的一种特异性蛇毒抗体结合变色，硝酸纤维素膜上标记的阳性对照也同时显色而阴性对照没有显色，观察硝酸纤维素膜上标记哪种毒蛇蛇毒种特异性抗体显色则为哪种蛇毒，就能正确判定蛇毒种类。