葡萄糖脱氢酶

摘要

本发明提供耐热性及底物特异性优异、且不受溶解氧影响的葡萄糖脱氢酶。具体地说，本发明涉及葡萄糖脱氢酶，其特征在于，来自真核生物，与加热处理前相比，液状下55℃加热处理15分钟后也保持90％以上的活性，本发明提供高效生产来自米曲霉的葡萄糖脱氢酶，且更实用的葡萄糖脱氢酶。本发明提供将底物特异性优异的来自丝状菌的FAD-GDH用重组体高表达生产的方法，以及用该方法得到的FAD-GDH蛋白质，及使用该蛋白质的葡萄糖测定试剂。本发明涉及提高包含可溶性葡萄糖脱氢酶(GDH)的组合物的稳定性的方法。可溶性GDH优选来自丝状菌的FAD依赖型GDH，特别是在来自丝状菌的FAD-GDH或来自土曲霉的FAD-GDH中最有效果。

主权项

1. 一种葡萄糖脱氢酶，其特征在于，来自青霉属丝状菌，具有以下(a)～(f)所示的理化性质：(a)～(f)所示的理化性质：(a)最适反应温度：50℃；(b)最适反应pH值：约6.5；(c)温度稳定性：55℃加热处理15分钟后GDH活性残存率为90％以上，60℃加热处理15分钟后GDH活性残存率为40％以上；(d)pH稳定性：5. 0～8.0(25℃处理16小时后活性残存率为90％以上)；(e)底物特异性：具有对葡萄糖的作用性为100％时对木糖为约10％、对2-脱氧-D-葡萄糖为约14％的作用性，对麦芽糖、果糖、阿拉伯糖、蔗糖、半乳糖、甘露糖、松三糖、山梨糖、核糖、麦芽三糖、麦芽四糖及海藻糖的反应性低于2％；(f)化学影响：受到铜、银及镉的强抑制，受到碘乙酸、N-乙基马来酰亚胺、羟胺及叠氮钠的抑制。