利用分子标记技术鉴定猴头菇菌种猴王的方法

摘要

利用分子标记技术鉴定猴头菇菌种猴王的方法包括菌丝培养与收集、基因组DNA的提取、SCAR-PCR分子标记的检测建立和SCAR-PCR产物的检测。本发明使用2对不同的引物猴王F1/R1和猴王F2/R2，对供测试的菌株进行SCAR-PCR分子标记的检测和SCAR-PCR产物的检测；当使用猴王F1/R1检测引物时，SCAR-PCR产物的检测结果在DNA图谱中显示的分子量为1012bp的特异DNA条带，为猴头菇菌种猴王的标志；当使用猴王F2/R2检测引物时，SCAR-PCR产物的检测结果在DNA图谱中显示的分子量为371bp的特异DNA条带，为猴头菇菌种猴王的标志。

主权项

1、一种利用分子标记技术鉴定猴头菇菌种猴王的方法，包括菌丝培养与收集、基因组DNA的提取、SCAR-PCR分子标记的检测建立和SCAR-PCR产物的检测；其特征在于(1)SCAR-PCR分子标记的检测，使用的检测引物是猴王F1/R1，其中，猴王F1是5′-CTCCTCCCTTCACAATAAATAGCCA-3′’，猴王R1是5′-TCCCTGAACTTCTTTGTCTTCCCGT-3′；(2)SCAR-PCR分子标记的检测建立：SCAR-PCR扩增体系为10×PCRbuffer 2.5μl，25mmol/L MgCL2 1μl，2.5m mol/L dNTP 2μl，5U/ul TaqDNA Polymerase 0.3μl，10μmol/L检测引物各1μl，1ng～10ng/μl模板DNA 1μl，ddH2O 16.2μl；SCAR-PCR反应条件为94℃ 1min；94℃ 45second，62℃ 45second，72℃ 1min，30个循环；72℃ 5min；(3)SCAR-PCR产物的检测结果：在电泳检测的DNA图谱中显示，扩增出的分子量为1012bp的特异DNA条带，为猴头菇菌种猴王的标志。