METHOD FOR SYNTHESIZING A CDNA IN A SAMPLE IN AN ENZYMATIC REACTION

摘要

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Synthese einer cDNA in einer Probe in einer enzymatischen Reaktion, wobei das Verfahren die Schritte umfasst, gleichzeitige Bereitstellung eines ersten Enzyms mit Polyadenylierungsaktivität, eines zweiten Enzyms mit reverser Transkriptaseaktivität, eines Puffers, mindestens eines Ribonukleotids, mindestens eines Desoxyribonukleotids, eines Anker Oligonukleotids, Zugabe einer Probe umfassend eine Ribonukleinsäure sowie Inkubation der Agenzien der vorhergehenden Schritte bei einem oder mehreren Temperaturschritten, welche so gewählt sind, dass das erste und das zweite Enzym Aktivität zeigen, wobei zusätzlich in dem selben Reaktionsgemisch eine Amplifikation erfolgt. Die Erfindung betrifft weiter einer Reaktionsgemisch umfassend ein erstes Enzym mit Polyadenylierungsaktivität, eines zweites Enzym mit reverser Transkriptaseaktivität, optional einen Puffer, optional mindestens ein Ribonukleotid, optional mindestens ein Desoxyribonukleotid, optional Anker Oligonukleotid und ein Enzym mit DNA Sytheseaktivität.