具有串联转录单位的重组流感病毒载体

摘要

本发明提供一种用于例如在没有辅助病毒的情况下使用含串联转录盒的载体制备流感病毒的组合物，其中所述串联转录盒包含PolI和/或PolII启动子。

主权项

1.组合物，所述组合物包含：a)至少一种质粒，所述质粒包含两种或更多种vRNA生产用转录盒，所述转录盒选自：一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PAcDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PB1 cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PB2 cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒HA cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒NP cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒NA cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒M cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；和/或一种转录盒，其含有效连接至流感病毒NS cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；和b)至少一种质粒，所述质粒包含一种或更多种mRNA生产用转录盒，所述转录盒选自：一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PA的DNA编码区的PolII启动子，所述DNA编码区连接至PolII转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PB1的DNA编码区的PolII启动子，所述DNA编码区连接至PolII转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PB2的DNA编码区的PolII启动子，所述DNA编码区连接至PolII转录终止序列；和/或一种转录盒，其含有效连接至流感病毒NP的DNA编码区的PolII启动子，所述DNA编码区连接至PolII转录终止序列，其中所述组合物包含8种用于vRNA的转录盒，其中用所述组合物转染细胞产生至少1×102 TCID50/mL的滴度。