一种固体发酵批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的方法

摘要

一种固体发酵批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的方法，属生物材料培养技术领域，操作包括配制固体培养基、灭菌、接种培养，收获活菌四个步骤，有收集湿菌体不需专门的离心机，即设备投资低、收获的活菌数多和无废液排放和环境污染问题的优点，适于用来批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的湿菌体，为工业化生产复合型活菌生物净水剂提供活菌原料，是一项能促进水产养殖的新技术。

主权项

1.一种固体发酵批量培养枯草芽孢杆菌变异菌株的方法，其特征在于，操作步骤：第1步配制固体培养基，按该培养基的重量百分比配方，黄豆饼粉2～60％、玉米粉2～60％、米糠2～40％、麸皮2～40％、硫酸铵0.4％和氯化铵0.2％，称取固体原料，将硫酸铵和氯化铵溶于重量为固体原料总重量的30～40％的水中，再与其余固体原料混和，搅拌均匀，均分为四份，分别投入四个固体发酵罐，制成相同的固体培养基四罐；第2步灭菌，在压力、温度和发酵罐转速分别为1.05～1.3kg/cm2、121～125℃和6～60rph的条件下，对四罐固体培养基进行高压灭菌处理，处理时间为30～60分钟；第3步接种培养，罐温降至40～50℃时，在发酵罐旋转的情况下，向每罐喷入重量为每罐中固体原料重量的30～40％的无菌水，当罐温降至30～40℃时，将预先经二级培养成的处于对数生长期的枯草芽孢杆菌变异菌株的细菌种子分别接入上二步所述的四个发酵罐，每罐的接种量为每罐固体原料重量的2～3％，在罐压、通风量、发酵罐转速和罐温分别为0.2～0.8kg/cm2、1600～2000L/h、6～60rph和30～40℃的条件下，对四罐变异菌株连续发酵培养20～50小时；第4步收获活菌，经上步处理，上述变异菌株大量繁殖，从四个发酵罐分别收获大量枯草芽孢杆菌变异菌株的湿菌体，每种湿菌体的重量与投入每罐内固体原料和水的重量相等，每克湿菌体含活菌数20亿～50亿个。