禽网状内皮组织增殖症病毒亚单位疫苗及其生产方法

摘要

本发明涉及一种禽网状内皮组织增殖症病毒亚单位疫苗的制备方法，即：利用Bac-to-BacBaculovirus Expression Systems，构建了能表达禽网状内皮组织增殖症病毒(REV)囊膜糖蛋白基因(env)的重组杆状病毒。用REV特异性单克隆抗体分别做间接免疫荧光抗体试验(IFA)和免疫转印试验，均可从感染的Sf9昆虫细胞中检出REV env。重组杆状病毒感染的Sf9细胞裂解后制备成油乳疫苗免疫SPF鸡后，可以诱发维持45天以上的特异性抗REV抗体，并可抵抗REV病毒感染。

主权项

1一种用于预防禽网状内皮组织增殖症病毒亚单位疫苗的生产方法，其特征是：用2005年7月20日送藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC1417的REVenv-rAcNPV重组杆状病毒以MOI值即感染倍数为2～3的量感染处于对数生长期的Sf9细胞，37℃培养4～5d，细胞膨胀变大，并有部分感染细胞悬浮于上清中后，收集细胞，经超声波裂解，以常规法按水相∶油相＝1∶3的比例制成油乳苗，相当于每毫升油乳苗中含有400万感染的Sf9细胞。