| 主权项 |
1.一种经由促进肿瘤细胞凋亡及/或活化淋巴细胞 以治疗肿瘤及/或预防肿瘤移转和复发之组合物, 其含有治疗有效量之可结合至该肿瘤细胞且具有 肿瘤细胞毒杀及/或活化淋巴细胞能力之外源凝集 素。 2.根据请求项1之组合物,其系用以治疗肿瘤。 3.根据请求项1之组合物,其系用以预防肿瘤转移。 4.根据请求项1之组合物,其系用以抑制肿瘤复发。 5.根据请求项1之组合物,其系用以治疗肿瘤及预防 肿瘤移转和复发。 6.根据请求项2、3、4或5之组合物,其中该肿瘤细胞 系为肝肿瘤细胞。 7.根据请求项6之组合物,其中该肿瘤细胞系为原位 肝肿瘤细胞。 8.根据请求项6之组合物,其中该肿瘤细胞系为经转 移之肝肿瘤细胞。 9.根据请求项8之组合物,其中该肿瘤细胞系为由大 肠直肠癌转移之肝肿瘤细胞。 10.根据请求项1之组合物,其中该外源凝集素系具 有促进肿瘤细胞凋亡之能力。 11.根据请求项1之组合物,其中该外源凝集素系选 自由刀豆外源凝集素A(Con A,concanavalin A)、豌豆外 源凝集素(PSA,Pisum sativum lectin)及菜豆外源凝集素-L (PHA-L,Phaseolus vulgaris)所组成之群。 12.根据请求项11之组合物,其中该外源凝集素系为 刀豆外源凝集素A。 13.根据请求项1之组合物,其中该组合物系为医药 组合物。 14.根据请求项1之组合物,其中该组合物系为食品 组合物。 15.根据请求项13之组合物,其系经由注射直接施至 肿瘤位置。 16.根据请求项13或14之组合物,其系经由口服。 17.一种外源凝集素之用途,其系用以制造经由促进 肿瘤细胞凋亡及/或活化淋巴细胞以治疗肿瘤及/ 或预防肿瘤移转和复发之药物,其中该外源凝集素 具有可结合至肿瘤细胞且有肿瘤细胞毒杀及/或活 化淋巴细胞能力。 18.根据请求项17之用途,其系用以制备治疗肿瘤之 药物。 19.根据请求项17之用途,其系用以制备预防肿瘤移 转之药物。 20.根据请求项17之用途,其系用以制备抑制肿瘤复 发之药物。 21.根据请求项17之用途,其系用以制备治疗肿瘤及 预防肿瘤移转和复发之药物。 22.根据请求项18、19、20或21之用途,其中该肿瘤细 胞系为肝肿瘤细胞。 23.根据请求项22之用途,其中该肿瘤细胞系为原位 肝肿瘤细胞。 24.根据请求项22之用途,其中该肿瘤细胞系为经转 移之肝肿瘤细胞。 25.根据请求项24之组合物,其中该肿瘤细胞系为由 大肠直肠癌转移之肝肿瘤细胞。 26.根据请求项17之用途,其中该外源凝集素系具有 促进肿瘤细胞凋亡之能力。 27.根据请求项17之用途,其中该外源凝集素系选自 由刀豆外源凝集素A、豌豆外源凝集素及菜豆外源 凝集素-L所组成之群。 28.根据请求项27之用途,其中该外源凝集素系为刀 豆外源凝集素A。 图式简单说明: 图1为类外源凝集素结合至ML-14a(a)、CT-26(b)、Huh-7(c )及淋巴细胞(d)之结果图。 图2为外源凝集素刺激ML-14a(a)、CT-26(b)及Huh-7(c)细 胞凋亡之结果图。 图3为外源凝集素刺激小鼠淋巴细胞增生之结果图 。 图4为刀豆外源凝集素A结合至肝肿瘤细胞之甘露 糖,以促进细胞凋亡之效果图。图4a为以刀豆外源 凝集素A-FITC染色之ML-14a、CT-26、Huh7及HepG2细胞经 流式细胞仪之侦测结果,其中甲基- D-喃甘露 糖系使用于阻却此结合;图4b至4d为已结合之刀 豆外源凝集素A经细胞凋亡以抑制细胞生长之结果 。ML-14a、CT-26、Huh7及HepG2细胞系与50 g/mL刀豆外 源凝集素A共同培养,且其生长及细胞凋亡系分别 以生存细胞计数及以膜联蛋白V染色估计。 图5为于活体内刀豆外源凝集素A抑制肝肿瘤结节 形成结果。于BALB/c小鼠之脾内注射ML-14a以形成肝 肿瘤结节,刀豆外源凝集素A系每三天静脉施予至 小鼠二至五次。于30或32日,测量肿瘤结节之个数 及尺寸。图5a至5c,刀豆外源凝集素A于肝肿瘤一周 大之小鼠中可抑制肝肿瘤生长。7.5 mg/kg之刀豆外 源凝集素A于第7日开始给予两次,可抑制肿瘤结节 之形成(图a及b,n=7)并可延长患肿瘤小鼠之寿命(图c ,n=10)。图5d至5e,刀豆外源凝集素A于肝肿瘤二周大 之小鼠中可部分抑制肝肿瘤生长,并延长其寿命。 7.5、10及15 mg/kg之刀豆外源凝集素A于第14日开始给 予两次,可部分抑制肿瘤结节之形成(图d,n=7)并可 延长患肿瘤小鼠之寿命(图e,n=10)。图5f至5g,刀豆外 源凝集素A于肝肿瘤三周大之小鼠中可部分抑制肝 肿瘤生长。10、15或20 mg/kg之刀豆外源凝集素A于第 21日开始给予两次,可抑制肿瘤结节之形成(图f,n=7) ,20 mg/kg之刀豆外源凝集素A并可延长患肿瘤小鼠之 寿命(图g,n=10);每一实验重复二至三次,并具有相同 之结果,*p<0.05。 图6为以刀豆外源凝集素A治疗肝肿瘤一周大之小 鼠之组织病理结果。于BALB/c小鼠之脾内注射ML-14a 以形成肝肿瘤结节,7.5 mg/kg刀豆外源凝集素A系于 第7日静脉施予至小鼠,并移去肝脏并以H&E染色。a: 未处理;b:以PBS处理;c与d:以刀豆外源凝集素A处理; 箭头系指淋巴细胞浸润。 图7为口服刀豆外源凝集素A防止原位肝肿瘤形成 结果图。口服刀豆外源凝集素A可预防肝肿瘤结节 之形成。于BALB/c小鼠之脾内注射ML-14a以形成肝肿 瘤结节,300及500 mg/kg刀豆外源凝集素A系自实验之 始每天口服施予至小鼠。每一实验重复二至三次, 并具有相同之结果,*p<0.05。 图8a与8b为刀豆外源凝集素A防止肝转移肿瘤形成 结果图。刀豆外源凝集素A可预防自大肠直肠癌细 胞之肝转移。于BALB/c小鼠之脾内注射CT-26后,CT26会 以肝转移形成肝肿瘤结节,7.5、10 mg/kg刀豆外源凝 集素A系自第2日静脉施予至小鼠四次,于21日可抑 制肝肿瘤结节之产生。每一实验重复二至三次,并 具有相同之结果,*p<0.05。 图9为刀豆外源凝集素A抑制肿瘤复发结果图。以 刀豆外源凝集素A治癒之小鼠再度以相同肿瘤挑战 ,此经刀豆外源凝集素A治疗之无肿瘤之小鼠(约30%) 于两个月后于背部再度接种ML-14a或CT-26细胞,并量 测肿瘤尺寸。每一实验重复二至三次,并具有相同 之结果,*p<0.05。 图10为刀豆外源凝集素A于SCID小鼠中抑制原位肝肿 瘤形成结果图。于SCID小鼠之脾内注射ML-14a以形成 肝肿瘤结节,10、15、20 mg/kg刀豆外源凝集素A于第7 日静脉施予至小鼠二次可抑制肿瘤结节形成(n=7), 于第21日,量测肿瘤结节之个数及尺寸。每一实验 重复二至三次,并具有相同之结果,*p<0.05。 图11为豌豆外源凝集素或菜豆外源凝集素-L于体内 抑制原位肝肿瘤结节之形成。于BALB/c小鼠之脾内 注射ML-14a以形成肝肿瘤结节,10、15 mg/kg之豌豆外 源凝集素或菜豆外源凝集素-L自第7日静脉施予至 小鼠二次可抑制肝肿瘤结节之形成(n=7)。于第21日 ,量测肿瘤结节之个数及尺寸。每一实验重复二至 三次,并具有相同之结果,*p<0.05。 |
