猪A组轮状病毒Vp4全基因真核表达质粒

摘要

一种猪A组轮状病毒Vp4全基因真核表达质粒，本发明属于生物基因领域，其特征是：从培养的RV中用反转录聚合酶链式反应(RT－PCR)技术扩增Vp4全基因，开放阅读框含2331bp，编码776个氨基酸。通过T－A克隆技术，亚克隆至pGEM－T载体中，获得pGEM－T－Vp4，将其及pVAX1均以KpnI和BamHI双酶切回收后，以T4DNA连接酶连接、转化，构建真核重组表达质粒pVAX1－Vp4。有益效果是：它按一定的量通过肌肉注射到体内产生体液免疫和细胞免疫，细胞免疫是在细胞内把表达的蛋白抗原通过MHC I类分子呈递抗原，从而激活CTL及杀灭靶细胞。这一点对轮状病毒来讲尤为重要。同时它既安全又有诱导全面免疫应答的高效性。此外，它还易于生产，稳定性强及安全可靠。

主权项

1、一种猪A组轮状病毒Vp4全基因真核表达质粒，其特征是：从培养的RV中用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增Vp4全基因，开放阅读框含2331bp，编码776个氨基酸，通过T-A克隆技术，将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-T载体中，获得重组克隆质粒pGEM-T-Vp4，将重组克隆质粒pGEM-T-Vp4及表达载体pVAX1均以KpnI和BamHI双酶切，纯化回收后，以T4DNA连接酶连接、转化，构建真核重组表达质粒pVAX1-Vp4。