信号序列捕获

摘要

本发明能够通过对先前构建的基因库或文库筛选在工业上感兴趣而使用常规筛选方法不太可能分离得到的分泌的、部分分泌的、或细胞表面展示的多肽(诸如酶、受体、细胞因子、肽激素等)的编码基因。本发明描述了由现有基因文库分离分泌的、部分分泌的、或细胞表面展示的多肽的编码基因的方法，其中使用体外多核苷酸插入反应来检测内源分泌信号序列，其中插入的多核苷酸包含无启动子且无分泌信号的分泌性报告基因。

主权项

1.用于由基因文库鉴定并分离目的基因的方法，其中所述基因编码携带用于分泌或部分分泌的信号序列的多肽，所述方法包括下列步骤：a)提供基因组DNA文库或cDNA文库；b)在所述文库中插入包含编码分泌报告蛋白的无启动子且无分泌信号的多核苷酸的DNA片段；c)将包含插入DNA片段的文库导入宿主细胞；d)筛选并选择分泌或部分分泌有活性的分泌性报告蛋白的宿主细胞；e)通过对插入的DNA片段侧翼的DNA测序，在选定宿主细胞中鉴定插入了分泌性报告基因的目的基因；f)分离在步骤(e)中鉴定的完整目的基因。