通过靶向抑制内源贮藏蛋白增强植物种子中异源多肽的累积

摘要

本发明涉及增加植物种子中异源蛋白的累积水平的改进方法，通过靶向抑制与异源蛋白竞争有限资源，诸如氨基酸、核糖体结合位点以及参与翻译和翻译后加工的酶的作用的内源蛋白来用于分子耕作。本发明提供了利用反义“抑制”或双链RNA－诱导的RNA干预或转录后基因沉默(PTGS)来抑制通过转录激活大麦醇溶蛋白基因获得的大麦中的转录因子的表达的方法。

主权项

1.一种增强植物种子中目的异源多肽的表达和累积的方法，所述方法包括：(a)用种子-特异性启动子的DNA序列转化植物细胞，所述启动子与编码一或多种转录调节因子(TF)或其部分，包括不同TF的嵌合组合可操作连接，调节一或多种编码种子贮藏蛋白的内源基因的转录，其中所述序列的转录链能够抑制、延缓或减少所述植物细胞中一或多种所述种子贮藏蛋白的表达，和(b)选择没有被(a)中所述转录调节因子识别的顺式作用元件的种子-特异性启动子，和(c)用(b)中的种子-特异性启动子的DNA序列转化(a)中的相同或其它的植物细胞，所述种子-特异性启动子与编码目的异源多肽的DNA序列可操作性连接；(d)由所述转化的植物宿主细胞再生植物，并在使所述编码一或多种TF或其部分的DNA序列被转录的条件下培养所述植物，由此减少所述内源mRNA的表达，因此减少所述种子贮藏蛋白的表达，且由此增强所述异源目的多肽的表达和累积。