用核酸酶解活性和杂交技术鉴别核酸分子的方法和组合物

摘要

本发明涉及鉴别在特定的条件下表达的一或多个核酸分子的方法，其基于所述核酸分子与已知序列的互补性，或在核酸分子群体中的突变或SNPs。该方法包括：将至少一种核酸探针分子与待测核酸分子群体接触，产生两者的混合物，用核酸酶解活性处理所述混合物，使对酶敏感的核酸分子被消化，将得到的混合物和附着有一或多种核酸分子的固体载体接触产生附着的核酸分子/核酸酶解活性保护的核酸分子复合物，从中鉴别一或多种附着的核酸分子或一或多种核酸酶解活性保护的核酸分子。本发明还提供用于进行本发明方法的组合物。

主权项

1.一种用于鉴定突变或单核苷酸多态性的方法，包括：a)在促进互补核酸分子之间发生杂交的条件下，至少一种含DNA的探针与待测群体的RNA分子发生接触，并形成探针-待测群体的核酸分子混合物，这种混合物包括至少一种所述的一种或多种探针分子与至少一种待测群体RNA分子杂交，其中所述的一种或多种探针对于待检测群体中存在的已知的或未知的一个或多个RNA分子至少是部分互补的，并且其中所述的至少一种探针的末端核苷酸具有单核苷酸多态性或突变；b)处理是指将至少一种酶解单链DNA分子的核酸酶与探针-待测群体的核酸分子混合，没有碱基配对的核苷酸被酶解，由此生成核苷酸分子群体，包括至少一个核酸酶保护的探针；c)接触是指在促进互补核酸分子之间发生杂交的条件下，含有至少一个核酸酶保护探针的核酸分子群体与具有一个或多个连接核酸分子的固体载体相接触并形成至少一种连接核酸分子/核酸酶保护的探针复合体，其中上述的至少一种连接核酸分子与上述的至少一种探针是部分互补的；d)通过检测至少一种连接核酸分子/探针复合体来鉴定上述单核苷酸多态性或突变。