一种无细胞短棒状杆菌制剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种无细胞短棒状杆菌制剂(NCP)的制备方法，是将短棒状杆菌(CP)工作种子批菌种连续2—4次传代后接种于大瓶或营养罐，在适宜培养基中培养5—7天，收集无杂菌污染的菌体，加热煮沸灭活得到菌液，无菌试验合格的菌液用破碎装置破碎，破碎后的菌体悬液经离心后收集沉淀，洗涤沉淀并制成悬液，将悬液加热灭菌，得到NCP。本发明中采用低热原适宜培养基，在整个生产过程中采用无菌、低热原操作，保证了最终产品低热原和无杂菌污染；采用加热灭活替代传统的甲醛灭活，产品中无甲醛残留；将CP破碎至纳米级，使产品粒度减小、颗粒均一，吸收度和扩散度提高，有利于人体吸收并提高药效；同时减少发烧、胸痛、注射局部红肿、硬结等副作用。

主权项

1.一种无细胞短棒状杆菌制剂，简称NCP的制备方法，包括如下步骤：1).短棒状杆菌，简称CP工作种子批菌种连续2-4次传代后接种于大瓶或营养罐，在培养基中培养5-7天；2).收集无杂菌污染的菌体，加热煮沸15-60分钟得到菌液；3).无菌试验合格的菌液经洗涤后，用破碎装置破碎菌体；4).菌体破碎后的悬液经离心后收集沉淀，洗涤沉淀制成悬液；5).将悬液加热灭菌，得到NCP。