海水藻蓝蛋白的制备方法

摘要

本发明涉及以海水螺旋藻为原料提取藻蓝蛋白的制备方法。目前所报道的藻蓝蛋白的制备方法，均采用低盐度的淡水培养基培养螺旋藻，经反复冻融破碎细胞后，用冷冻高速离心方法进行固液分离，硫酸铵盐析、0-4℃透析、上色谱柱、多次梯度洗脱、洗脱液用硫酸铵盐析、0-4℃透析、低温冷冻干燥等工艺，虽然能达到高纯度，但工艺路线长、大部分过程需在低温下进行、提取周期长，因而成本高、效率低，生产应用价值不高。本发明的目的是通过海水培养螺旋藻，以此为原料大量、低成本提取较高纯度的藻蓝蛋白，应用于天然色素、保健食品和海洋新药的研究开发，本方法具有原料特殊、工艺简单、提取率高和成本低的特点。

主权项

1、一种海水藻蓝蛋白的制备方法，其特征在于采用海水或人工海水为培养基培养螺旋藻藻种，其具体步骤包括如下：1)、采收藻体，冲洗，干燥，将海水螺旋藻干品加入含有食用稳定剂、糖类、无机盐类、pH调节剂保护成分的水溶液中；2)、1)中混合液在0-50℃条件下搅拌提取，去除残渣，得藻蓝蛋白粗提物上清液；3)、2)中藻蓝蛋白粗提物上清液的纯化由下列A、B两步进行，A、B两步可颠倒顺序进行：A、粗提物上清液经超滤脱盐浓缩后，向提取物中直接加入用0.075-0.05M磷酸缓冲溶液平衡过的色谱分离材料羟基磷灰石，使溶液的浓度和pH参数刚好使C-藻蓝蛋白不被吸附，搅拌，去除羟基磷灰石；所述的磷酸缓冲溶液是pH6-7，含0.1-0.5MNaCl的磷酸缓冲溶液；B、提取液加入硫酸铵搅拌，使藻蓝蛋白盐析沉淀，离心收集藻蓝蛋白沉淀，超滤脱盐；4)、所得脱盐溶液进一步超滤浓缩，得藻蓝蛋白液态制品；将浓缩液低温冷冻干燥或喷雾干燥，得藻蓝蛋白固体制品；5)、藻蓝蛋白固体产品的进一步纯化，加入用0.001-0.01M磷缓冲溶液平衡过的羟基磷灰石混合，然后去除上清液，收集色谱材料羟基磷灰石，加入0.025-0.075M，含有0.1-0.5MNaCl、pH为6-7的磷酸缓冲溶液浸泡，所得的藻蓝蛋白的纯度可接近或达到生化试剂标准。