一种芯片原位聚合酶链反应检测目标基因的方法

摘要

一种利用基因芯片的检测方法，是在芯片表面进行原位PCR反应对待测基因进行检测的方法。将普通PCR反应中的上游引物连接poly(T)的臂结构后，5’端氨基修饰后连接于醛基修饰的玻片等载体上，在芯片表面上进行的一种芯片原位PCR反应。利用本发明能有效解决目前基因芯片杂交中小片断探针和待测大片段不能有效杂交的问题，实现了样品处理和标记同步化和原位检测。本发明可用于SNP检测、转基因植物检测、疾病检测等方面。

主权项

1.一种芯片原位PCR检测目标基因的方法，其特征在于根据目标基因设计一对特异性引物，上游引物的5’端连接有15-20个碱基长的多聚胸腺嘧啶结构，这种上游引物的5’端再经氨基修饰后点于醛基修饰的玻片上，然后以待测样品的基因组脱氧核糖核酸为模板，在芯片上进行原位PCR反应，利用DNA聚合酶的特异性来实现对特定目的片段的扩增，在引物延伸过程中加入地高辛标记的dUTP，随后采用传统酶标技术对延伸产物进行检测，使检测结果通过底物颜色呈现于尼龙膜或硝酸纤维膜表面，检测结果可直接目测或用廉价的光学扫描仪读取数据，从而实现样品的处理、标记同步化和原位检测。