主权项 |
1.家蚕丝素固定化细胞生产L-天门冬氨酸的工艺,其特征在于:其制备L-天门冬氨酸的工艺过程为:(1)称取一定量蚕丝下脚料,Na2CO3溶液煮沸脱胶,洗净,得到丝 素纤维,完成蚕丝的净化与脱胶处理;(2)将丝素纤维用CaCl2溶解丝素纤维,于流水中透析,得到无色透 明丝素溶液,浓缩至浓度为20-30%备用,完成丝素的溶解、脱 盐;(3)用低浓度环氧化合物(分子量1000-8000)处理丝素溶液;(4)按常规方法培养大肠杆菌;(5)将收集好的菌体悬浮于生理盐水中,于40-50℃水浴中保温,备 用。将制备好的交联丝素溶液,然后冷却至40-50℃。在水浴中, 将两者混匀后放入灭过菌的容器中形成液层,于冰箱中冷却固化 成凝胶,取出后置于磷酸缓冲液中,于冰箱中搅拌后用KCl溶液 洗涤后切成立方小块备用,完成丝素凝胶固定化细胞的制备;(6)将填充柱式生物反应器安装于37℃的恒温生化培养箱中,将准备 好的固定化大肠杆菌细胞凝胶块装填于反应器内,形为固定化活 细胞生物反应器;(7)先将延胡索酸铵与MgCl2的混和液,过滤后加热,配制底物溶液 放置于恒温生化培养箱中,使底物流过固定化大肠杆菌生物反应 器进行转化反应;(8)采用常规方法进行L-天门冬氨酸的分离与纯化。 |