以毛细管式电导阻断法测定细菌对抗生素感受性之方法

摘要

本发明系有关于一种以毛细管式电导阻断法测定细菌对抗生素感受性之方法(capillary conductance-interruptedmethod；CCM)，其将细菌培养于两端含有一对白金电极的毛细管(0.75或1.0mm之内径)中，管内充满培养液，细菌生长所产生的代谢物可形成气泡，其气泡可将毛细管之电传导路径阻断；以此CCM测定七种抗生素，诸如ampicillin(胺霉素)，cephalothin(头孢辛)，cefotaxime(头孢它杏)，amikacin(阿米康素)，gentamicin(正大霉素)，ciprofloxacin(赛卜福辛)，cefuroxime(头孢欧杏)，对4株细菌( Escherichia coli ATCC 25922，Escherichia coli03190,Klebsiellapneumoniae 03583, Enterobacter cloacae 00109)之最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration；MIC)，发现这七种药物的MIC与传统微量稀释法(micro dilution method)比较，其吻合度(在±1log2范围内)均达到100%之良好结果。此CCM法的优点是量测体积很小(只0.045ml)，且具有线上及时监测和自动化之潜力，与传统方法比较，可节省1/2至2/3的时间。(一)、本案代表图为：第一图(二)、本案代表图之元件代表符号简单说明：

主权项

1.一种以毛细管式电导阻断法测定细菌对抗生素感受性之方法:将细菌培养于两端含有一对电极,且内部充满培养液之毛细管中;细菌生长所产生之代谢物可形成气泡,气泡可将毛细管二端电极之电传导路径阻断;量测毛细管中电导度之改变;电传导阻断迅号可测定细菌对抗生素之感受性。2.如申请专利范围第1项所述「以毛细管式电导阻断法测定细菌对抗生素感受性之方法」,其中,适当的培养液为Muller-Hinton broth (MHB)(米勒-辛顿培养液)及cation-adjusted Muller-Hinton broth (CAMHB)(经阳离子调整之米勒-辛顿培养液)。3.如申请专利范围第1项所述「以毛细管式电导阻断法测定细菌对抗生素感受性之方法」,其中,毛细管之管径介于0.5mm~1.5mm之间者。图式简单说明:第一图:本发明以毛细管式电导阻断法测定细菌对抗生素感受性之原理示意图第二图:本发明毛细管反应槽之结构图第三图:本发明以一电导度计连接一组PLC装置,藉其多通道分时多工的功能,将系统扩充至七通道,并透过程式以电脑控制整个量测,而讯号之自动撷取与即时绘图显示,达到自动化检测之系统硬体架构图第四图:本发明毛细管电导阻断法之讯号变化,测试菌株:E.coli ATCC 25922;A曲线:不接种细菌;B群曲线(四重复):细菌接种浓度为5105cfu/ml第五图:本发明毛细管式电导阻断法之讯号变化,测试菌株:E.coli ATCC 25922,抗生素:amikacin;A:正对照组(不添加抗生素),B,C,D,E,及F:amikacin浓度分别为0.25,0.5,1,2,及4g/ml,G为负对照组(不添加细菌);由此实验求得MIC为1g /ml(曲线D)。第六图:本发明毛细管式电导阻断法之讯号变化,测试菌株:E.coli 03190,抗生素:gentamicin;A:正对照组(不添加抗生素),B,C,D,E,及F:gentamicin浓度分别为0.125,0.25,0.5,1,及2g/ml,G:负对照组(不添加细菌);由此实验求得MIC为0.5g/ml(曲线D)。