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1、一种马哈利樱桃砧木快速繁殖方法，其特征在于它包括如下步骤： (1)组培苗的制备 原材料的预处理：剪取大田栽培的盛果期优良单株的无病虫害的健壮营养 枝，切取其幼芽，流水冲洗干净，用干净滤纸吸干；在超净工作台上将冲洗干净 的幼芽在70％酒精中浸泡10～30秒，无菌水冲洗3次，每次5分钟，再置入0.1％ HgCl<sub>2</sub>溶液中灭菌6～8分钟，用无菌水冲洗幼芽3～5次，每次5分钟，最后用 无菌滤纸吸干，作为外植体扦插入1/2MS基本培养基中使芽生长，每隔3～5天 将芽转接入新的1/2MS基本培养基中，重复2～3次，待培养基不再变色时，将 芽转接入芽生长培养基中，该芽生长培养基为在1升MS基本培养基中加入下述 的原料及其配比制成： 白砂糖15～80g 琼脂粉4～10g 6-(苄胺基)嘌呤0.2～0.5mg 当芽长至1.5～3cm，有3～5片真叶时，将苗转入增殖培养基中进行快速繁 殖，该增殖培养基为在1升MS基本培养基中加入下述的原料及其配比制成： 白砂糖15～80g 琼脂粉4～10g 6-(苄胺基)嘌呤0.3～4mg 吲哚乙酸0.3～0.9mg 赤霉素0.1～3mg 酪蛋白0.01～0.05g 配制好的增殖培养基分装在培养瓶中，每瓶装25～35毫升，盖好瓶盖，在 压力为0.1～0.15MPa下灭菌25分钟，将增殖生长的丛生芽分离成单个芽接入培 养瓶中，其中生长较快的苗在转接时可切成带1～2个芽的茎段扦插于增殖培养 基上，培养瓶置于光照强度为3500～4500lx、温度为20℃～30℃、湿度为70％～ 90％的培养室中培养，每天照射10～12小时，每一次继代培养使用新鲜配置的 增殖培养基，继代培养条件与第一代培养条件相同，选取繁殖8～30代的1.5～ 3cm高的健壮组培苗或1.5～3cm的带顶芽的上部茎段为材料进行生根培养。 (2)组培苗生根培养 将(1)中切好的组培苗或茎段放入生根培养基中进行生根培养，该生根培 养基为在1升1/2MS基本培养基中加入下述的原料及其配比制成： 白砂糖15～80g 琼脂粉4～10g 吲哚-3-丁酸0.1～0.9mg 或所用的生根培养基为在1升1/2MS基本培养基中加入下述的原料及其配比 制成： 白砂糖15～80g 琼脂粉4～10g 吲哚乙酸0.5～3.5mg 将配制好的生根培养基分装在培养瓶中，每瓶25～35毫升，盖好瓶盖，在 压力为0.1～0.15MPa下灭菌25分钟，培养瓶移入温度为18℃～22℃、湿度为 70％～90％的暗室中进行暗培养，暗培养3～7天； (3)长苗炼苗培养 将经过暗培养的培养瓶直接移入光照强度为800～8000lx、温度20～25℃、 湿度为75％～90％的温室内，每天光照9～11小时，驯化20～25天，打开瓶盖 加入0.5～1.0厘米高自来水炼苗5～10天，当苗高2～6厘米，根长1～2.5厘米 时进行移栽。 (4).移栽 取出(3)中经过炼苗的幼苗，洗净根上残留的生根培养基，用浓度为100ppm 的生根粉浸泡处理幼苗根部，移入装有营养土的移栽容器中，移栽前浇足1/10MS 基本培养基溶液，上覆盖塑料薄膜，保持湿度在70％～100％，7天后逐渐通风， 15天后揭膜，在此期间喷洒1/10MS基本培养基溶液，继续在光照强度为800～ 8000lx、温度20～25℃、湿度为70％～90％的温室内，培养20～50天，在苗高5～ 15厘米，有8～15片叶时移栽入大田。 |
