非内源的被组成型活化的人G蛋白偶联的受体

摘要

在此公开的是内源人G蛋白偶联受体(GPCR)的组成型活化的非内源形式，该受体含有(a)下列氨基酸区域(从C－末端到N－末端走向)和/或(b)横跨GPCR的跨膜－6(TM6)和细胞内环－3(IC3)区域的下列核酸序列区域(3’到5’走向)，分别是：(a)P¹AA₁₅X和/或(b)P^密码子(AA－密码子)₁₅X_密码子。在最优选的实施例中，P¹和P^密码子分别是内源脯氨酸和编码脯氨酸的内源核酸编码区，它位于非内源GPCR的TM6内；AA₁₅和(AA－密码子)15分别是15个内源氨基酸残基和15个编码内源氨基酸残基的密码子；X和X_密码子分别是非内源赖氨酸和编码赖氨酸的非内源核酸编码区，它位于非内源GPCR的IC3内。因为最优选包含这些突变的非内源人GPCR被引进哺乳动物细胞并被用作筛选候选化合物，所以包含这些突变的非内源人GPCR在本质上不需要被纯化和分离(即它们被引入到哺乳动物细胞的细胞膜上)，尽管如此纯化与分离的非内源的人GPCR是在本公开的范围之内。

主权项

1.一种内源的人孤儿G蛋白偶联受体(GPCR)的组成型活化的非内源形式，该受体含有下列氨基酸残基(从C-末端到N-末端走向)，它们横跨非内源的GPCR的跨膜-6(TM6)和细胞内环-3(IC3)区域：P1AA15X其中：(1)P1是位于非内源GPCR的TM6区域内的一个氨基酸残基，其中，P1选自(i)内源的孤儿GPCR脯氨酸残基和(ii)除脯氨酸之外的非内源的氨基酸残基；(2)AA15是15个氨基酸残基，它们选自(a)内源的孤儿GPCR的15个内源氨基酸残基、(b)15个非内源的氨基酸残基和(c)15个组合的氨基酸残基，其中含有内源孤儿GPCR的至少一个内源氨基酸残基和至少一个非内源氨基酸残基的组合，除非在位于GPCR的TM6区域内的15个内源氨基酸残基都不是脯氨酸；和(3)X是位于所说的非内源GPCR的IC3区域内的非内源氨基酸残基。