弓形虫虫体、风疹、巨细胞、疱疹Ⅰ、Ⅱ病毒抗原纯化工艺

摘要

本发明涉及一种TORCH抗原纯化工艺,该工艺是将风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒培养液离心分离后和弓形虫腹水经离心分离再稀释的虫体液进行沉淀分离得沉淀物,再将沉淀物溶解,然后经透析得浓缩病毒液和弓形虫提取浓缩液,将浓缩液过DEAE类阴离子交换柱,收集各蛋白峰,包被酶标板,并用已知阳性血清做间接ELISA试验检测抗原活性高峰液收集,即为纯化TORCH;本发明的工艺收率高可达80%以上、生产的抗原纯度高、工艺简便,可批量生产、批间差异小、一个批次可生产100万人份以上的抗原。

主权项

1、一种TORCH抗原纯化工艺，其特征在于含有下述步骤：(1)将风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒I型、II型的培养液，经离心去除细胞碎渣后，沉淀离心分离得病毒沉淀物；(2)将弓形虫腹水离心去除细胞，然后加入的0.01mol、PH＝7的磷酸盐(PBS)缓冲液稀释，离心后弓形虫腹水与缓冲液的体积比为1∶(0.8-1.3)，再沉淀后离心分离得弓形虫病毒沉淀物；(3)将上述(1)、(2)两步沉淀所取得的病毒深沉物分别溶于0.01mol、PH＝8.0的Tris-HCl-0.001molEDTA的缓冲液中；然后再将溶解液采用透析得病毒浓缩液；(4)将病毒浓缩液用离子交换柱进行分离并用0.01mol、PH＝8的Tris-HCl-0.001molEDTA缓冲液含0.2-0.5mol的NaCl作梯度洗脱，收集各蛋白峰，包被酶标板，并用已知阳性血清，做间接ELISA试验检测抗原活性高峰液收集，即为纯化TORCH抗原。