厌氧菌感染的一种快速诊断的方法

摘要

厌氧菌感染的一种快速诊断的方法,涉及一种厌氧菌感染的诊断方法。其具体步骤为:标本采集,标本的预处理,标本的固相微萃取(SPME),气相色谱分析,由检测出的厌氧菌代谢产生的挥发性短链脂肪酸成分峰,诊断出厌氧菌的存在。采用本发明,标本采集无特殊要求,标本保送无特殊条件要求及时间限制,不需培养,可以快速检测出患者是否有厌氧菌感染情况,诊断时间仅需30～40分钟。本发明不受正常寄居菌的影响,检测阳性率高,诊断可靠。不仅可用于厌氧菌感染的诊断,而且可用于病情监测,对厌氧菌感染性疾病的诊治有很高价值。

主权项

1、厌氧菌感染的一种快速诊断的方法，其特征在于其具体步骤为：1)标本采集：用临床普通常规方法采集标本2)标本的预处理：(1)液体标本直接加饱和氯化钠成饱和溶液后盐析，(2)粘稠标本，如痰、脓类，加酸如2～10％盐酸+次氯酸(1∶2～6)或酶震荡消化数分钟，充分溶解后，再加饱和氯化钠盐析，酶包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、菠萝蛋白酶，(3)固体标本，如组织块，先剪碎研磨成匀浆，再加酸或酶震荡消化成溶液，后加饱和氯化钠盐析，酸与酶如上，3)标本的固相微萃取(SPME)：萃取针头采用有聚乙烯乙二醇/二乙烯苯、聚乙烯乙二醇/阴离子树脂或聚二甲基硅氧烷/二乙烯苯复合涂层的针头，萃取方式采用密封瓶离取样液面1公分左右顶空萃取法，萃取1分钟以上，或液中萃取5分钟以上，4)气相色谱分析：色谱柱——弹性石英毛细管色谱柱或填充柱，固定相为聚乙二醇20M和2-硝基对苯二甲酸的反应物，简称FFAP，载气——N2，检测器——氢火焰检测器或热导池类检测器，汽化室温度——200～250℃，脱附时间——5～10以上秒，柱温——90～150℃下恒温，为理想分离各成分峰，或在60～220℃分二阶或多阶程序升温，灵敏度——102～3，衰减1/1～8，5)诊断：采用定性诊断，以明确、清晰检出以下成分峰为阳性，即为厌氧菌感染(1)明确、清晰检出有异丁酸、戊酸、异戊酸峰中之一者，(2)明确、清晰检出有乙酸、丙酸及另外一种短链脂肪酸峰中之一者，(3)明确、清晰检出有二种非异丁酸、戊酸、异戊酸、乙酸、丙酸的短链脂肪峰者。