用于特异性核酸检测和定量的同组异序引物延伸方法及其试剂盒

摘要

本发明公开了一种用同组异序引物延伸法检测和/或定量样品中存在的靶DNA或RNA的方法。本方法包括于不存在某一游离核苷酸时进行引物延伸反应,从而当不存在的该核苷酸要被插入时,引物延伸反应被终止。所以,检测引物延伸产物中标记的核苷酸掺入的量,就可确定样品中靶RNA或DNA的量。

主权项

权利要求书1.一种检测或定量样品中靶核酸的方法，其特征在于，包括：(a)制备一种或多种引物，该引物特异性配对于靶核酸的预定位置；(b)在高度严谨的条件下，将(a)中的一种或多种引物与靶核酸退火，在靶核酸预定位置上得到引物-核酸双链体；(c)使(b)的引物-核酸双链体与以下混合物混合，该混合物包括；(1)一种或两种或三种类型的游离的非终止子核苷酸和至少一种类型的的任选地标记有可检测的标记物的非终止子核苷酸，和(2)有或无一种类型与(1)的一种或两种或三种类型非终止子核苷酸不同的终止子核苷酸；(d)在合适的缓冲液中用酶或化学反应进行引物延伸反应；和(e)检测或定量引物延伸的核苷酸中标记信号的量，或(f)用质谱检测或定量延伸的引物的量。