3型人副流感病毒的感染性克隆

摘要

本发明提供了用于生产重组人副流感病毒、尤其是感染性重组人副流感病毒3型(HPIV－3)的系统。在一个实例中,该系统包含一个克隆,该克隆包含的核苷酸序列编码HPIV的全长正义反基因组;以及至少一个支持克隆,该克隆包含编码HPIVP蛋白和HPIVL蛋白的核苷酸序列。在另一个实例中,该系统还包含一个支持克隆,该克隆包含编码HPIVNP蛋白的核苷酸序列。本发明还提供了一个克隆,该克隆包含编码HPIV－3全长正义反基因组的核苷酸序列。该克隆还包含RNA聚合酶启动子与HPIV－3反基因组编码序列操作性相连。在一个较佳的实例中,克隆还包含编码紧靠HPIV－3反基因组编码序列下游的核酶的核苷酸序列。本发明还涉及一种制备HPIV－3基因组中具有定点突变的重组HPIV－3病毒的方法。该方法包括:制备含有修饰的HPIV－3反基因组编码序列的克隆;将修饰的HPIV－3克隆、包含编码HPIV－3P蛋白和HPIV－3L蛋白以及较佳的包含编码HPIV－3NP蛋白的核苷酸序列的支持克隆导入宿主细胞;和在一定条件下培养宿主细胞,该条件允许合成修饰的HPIV－3反基因组和HPIV－3的L、P和NP蛋白。

主权项

1.一个重组HPIV克隆，该克隆包含：a.编码人副流感病毒正义反基因组的核苷酸序列；和b.与所述核苷酸序列操作性相连的RNA聚合酶启动子。