AMPLIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS UTILIZANDO UN UNICO CEBADOR.

摘要

SE DESCUBRE UN METODO PARA DETERMINAR LA PRESENCIA DE UN INDICADOR POLINUCLEOTIDO EN UNA MUESTRA SUSCEPTIBLE DE CONTENER TAL INDICADOR. EL METODO COMPRENDE (A) FORMACION COMO RESULTADO DE LA PRESENCIA DE UN INDICADOR DE UN POLINUCLEOTIDO SENCILLO QUE COMPRENDE UNA SECUENCIA DE ENLACE DEL POLINUCLEOTIDO OBJETO FLANQUEADO POR UNA PRIMERA Y SEGUNDA SECUENCIAS DE POLINUCLEOTIDOS QUE DIFIEREN DE LA SECUENCIA DEL INDICADOR O UNA SECUENCIA COMPLEMENTARIA DE LA SECUENCIA DEL INDICADOR (B) FORMACION DE MULTIPLES COPIAS DEL POLINUCLEOTIDO SENCILLO, Y (C) DETECCION DEL POLINUCLEOTIDO SENCILLO. TAMBIEN SE DESCUBRE UN METODO PARA PRODUCIR AL MENOS UNA COPIA DE UN POLINUCLEOTIDO SENCILLO. EL METODO COMPRENDE (A) FORMACION EN PRESENCIA DE TRIFOSFATOS, NUCLEOTIDOS Y POLIMERASA POLINUCLEOTIDA DEPENDIENTE DE UNA EXTENSION DE UN POLINUCLEOTIDO IMPRIMADOR DE AL MENOS LOS 3'' EXTREMOS DE LOS CUALES TIENE AL MENOS UNA SECUENCIA DE BASE 10 HIDRIZABLE CON UNA SEGUNDA SECUENCIA FLANQUEANDO LOS 3'' EXTREMOS DEL POLINUCLEOTIDO SENCILLO, SIENDO LA SEGUNDA SECUENCIA PARCIAL O TOTALMENTE COMPLEMENTARIA CON AL MENOS UNA PRIMERA SECUENCIA DE BASE 10 FLANQUEANDO LOS 5'' EXTREMOS DEL POLINUCLEOTIDO SENCILLO, (B) DISOCIACION DEL IMPRIMADOR POLINUCLEOTIDO EXTENDIDO Y DEL POLINUCLEOTIDO SENCILLO, (C) REPETICION DEL PASO (A) Y (D) DISOCIACION DEL POLINUCLEOTIDO IMPRIMADOR EXTENDIDO Y DE LA COPIA DEL POLINUCLEOTIDO SENCILLO.